[发明专利]一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201510296790.7 | 申请日： | 2015-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN104865242A | 公开（公告）日： | 2015-08-26 |
| 发明（设计）人： | 魏琴;吕晓辉;王晓东;马洪敏;曹伟;杜斌;吴丹;胡丽华;李贺;罗川南;庞雪辉;张勇 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 250022 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 npco co sub au rusi ru bpy sup 构建 真菌 毒素 激素类 | ||
技术领域
本发明涉及一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器的制备方法及应用。具体涉及一种RuSi@Ru(bpy)32+作为发光材料，纳米复合物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+作为捕获抗体基底的电致化学发光传感器的制备与应用，属于电致化学发光检测技术领域。
背景技术
真菌毒素是广泛存在于自然界的农产品污染物，真菌毒素具有强烈的肾脏毒性，肝脏毒性和神经毒性，并且有致畸、致癌和致突变作用。真菌毒素的存在对人类和动物健康以及畜牧业发展构成了巨大的威胁。激素是由人和动物某些细胞合成和分泌、能调节机体生理活动的特殊物质，和神经系统一起调节人体的代谢和生理功能。正常情况下各种激素是保持平衡的，如因某种原因使这种平衡打破了这就造成内分泌失调，会引起相应的临床表现。因此，可利用测定真菌毒素和激素的含量来判断农产品污染状况及疾病诊断。
目前真菌毒素和激素的检测方法主要是色谱分析和免疫分析法，例如薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。虽然色谱分析灵敏度很高，但是色谱分析需要繁琐的样品预处理、预富集、仪器操作步骤复杂等缺点。为了克服以上色谱分析方法的缺点，本发明设计了一种简单、快速、灵敏度和选择性高的电致化学发光免疫分析方法。
本发明利用RuSi@Ru(bpy)32+为电致化学发光信号源，RuSi@Ru(bpy)32+通过共价键固载在NPCo/Co3O4-Au表面制得抗体捕获基底，利用NPCo/Co3O4-Au优良的生物兼容性和大的比表面积将抗体固载在纳米复合物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+表面。在本发明中制备的电致化学发光传感器具有操作简单，成本低，灵敏度高，特异性高等优点，克服了传统色谱分析的很多不足。
发明内容
本发明的目的是针对现有的真菌毒素和激素检测方法存在的问题，提供一种简单快速可靠的基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的电致化学发光传感器的制备方法和应用，实现对真菌毒素和激素的灵敏、特异、快速、高效检测。
本发明的技术方案如下：
1. 一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器的制备方法
（1）将直径4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净；
（2）滴涂6 μL、0.5~2 mg mL-1的待测物抗体孵化物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+/Ab溶液于电极表面，4℃保存至干燥；
（3）滴加4 μL、质量分数为1~3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH6.4~8.4的PBS溶液冲洗电极表面，4℃晾干，制得一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器。
2. 待测物抗体孵化物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+/Ab溶液的制备
（1）NPCo/Co3O4-Au的制备
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