[发明专利]一种合成特立帕肽的方法

说明书

本发明涉及医药合成领域，公开了一种合成特立帕肽的方法。所述方法将N端偶联有保护基的Phe在偶联试剂和活化试剂作用下和HMP Linker树脂进行酯化反应，得到肽树脂1；按照特立帕肽氨基酸序列C端到N端的顺序，从肽树脂1出发，在缩合试剂和活化试剂作用下，将其余保护氨基酸进行逐一延伸偶联，每次延伸偶联后均得到对应的肽树脂，最终获得特立帕肽树脂，然后酸解获得特立帕肽粗品，特立帕肽粗品纯化转醋酸盐得到特立帕肽纯品。本发明选择合适的合成方案，选择HMP Linker树脂作为载体树脂，并优化了整个合成工艺，获得了高纯度产品，提高了特立帕肽的总收率，并且对任何环境无危害。

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成特立帕肽的方法。

背景技术

特立帕肽是一种合成的34肽，为人甲状旁腺素PTH的1-34氨基酸片段，氨基酸顺序如下：

H-Ser¹-Val²-Ser³-Glu⁴-Ile⁵-Gln⁶-Leu⁷-Met⁸-His⁹-Asn¹⁰-Leu¹¹-Gly¹²-Lys¹³-His¹⁴-Leu¹⁵-Asn¹⁶-Ser¹⁷-Met¹⁸-Glu¹⁹-Arg²⁰-Val²¹-Glu²²-Trp²³-Leu²⁴-Arg²⁵-Lys²⁶-Lys²⁷-Leu²⁸-Gln²⁹-Asp³⁰-Val³¹-His³²-Asn³³-Phe³⁴-OH

该片段是含有84个氨基酸的内源性甲状旁腺素PTH具有生物活性的N-末端区域。本品的免疫学和生物学特性与内源性甲状旁腺素PTH以及牛甲状旁腺素PTH(bPTH)完全相同。

特立帕肽是第一种获得美国食品及药物管理局FDA批准的骨形成剂类新药，这种甲状旁腺激素的衍生物可以通过增加成骨细胞的活性及数量而促进骨生长，而目前的常规骨质疏松药物一般只是作用于破骨细胞而减缓或阻断骨质流失，特立帕肽是由礼来药厂生产的，涉及到1637例绝经后骨质疏松症患者的临床研究结果显示，与那些只服用了钙和维生素D补加剂的患者相比，96％的患者在接受该药治疗后，其脊柱和臀部的骨(矿物质)密度BMD均表现出显著增加，此外还发现，该药能够分别减少发生脊柱骨折和其他类型骨折危险的65％和53％。

对于本品制备的方法，已有专利技术进行公开。中国专利CN102731643A公开了以2-氯三苯甲基氯树脂(2-CTC树脂)为固相载体风味5个片段进行偶联，虽然该方法可以缩短合成周期，但是其总收率最高仅为32.2％。

当下比较流行的合成方法为固相逐步合成法(SPPS)，该方法具有操作简单和设备要求低的优点，但是该方法也因为总收率较低而限制了特立帕肽的生产效率。如专利CN103467595A，其在逐步合成偶联到17位丝氨酸时，以未保护的丝氨酸和16位天冬酰胺羧基进行酯缩合，在获得粗肽后再将酯键转化为酰胺键，其总收率最高为42.1％。专利CN104017064A也公开了一种逐步合成方法，其在合成16-17位氨基酸时采用假脯氨酸二肽、并以特定的裂解液裂解，其总收率最高为38％。专利CN104530218A公开了一种逐步合成方法，以王树脂或2-CTC树脂为固相载体合成，其总收率为34.72％。