[发明专利]一种小鼠皮肤组织TRPV3蛋白的提取方法在审
申请号: | 201510290429.3 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN104910267A | 公开(公告)日: | 2015-09-16 |
发明(设计)人: | 李志远;李彩月;马文波 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/14 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510530 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小鼠 皮肤 组织 trpv3 蛋白 提取 方法 | ||
1.一种小鼠皮肤组织TRPV3蛋白的提取方法,其特征在于,将新生小鼠的皮肤组织用中性蛋白酶处理分离出外表皮,以该皮肤外表皮为材料提取TRPV3蛋白。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
将出生1~2天的小鼠处死后,剪下其皮肤组织,清洗,将清洗后的皮肤组织按照外表皮在上的方式放置,加入质量分数2.5%的中性蛋白酶在4℃条件下浸润10h,将外表皮从皮肤组织块上剥下,清洗后吸干残余液体,称量,将皮肤外表皮剪碎,按每50mg皮肤外表皮加入500μl裂解液的量加入裂解液,研磨,混匀,裂解完全后,再离心收集的蛋白上清液即为含TRPV3蛋白的溶液。
3.根据权利要求1或2所述的提取方法,其特征在于,所述的中性蛋白酶为dispase分散酶。
4.根据权利要求2所述的提取方法,其特征在于,所述的裂解液为Mammalian Protein Extraction Reagent。
5.根据权利要求2所述的提取方法,其特征在于,所述的皮肤组织是新生小鼠背部的皮肤组织。
6.根据权利要求2所述的提取方法,其特征在于,所述的清洗是用PBS溶液清洗2-5次。
7.根据权利要求2所述的提取方法,其特征在于,所述的离心为4℃,12000rpm离心10min。
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