[发明专利]利用循环放大体系构建一种灵敏检测的通用方法有效
申请号: | 201510289746.3 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN104950106B | 公开(公告)日: | 2017-07-28 |
发明(设计)人: | 刘世勇;刘固寰 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;C09K11/06 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司11021 | 代理人: | 王旭 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 循环 放大 体系 构建 一种 灵敏 检测 通用 方法 | ||
1.一种能够放大信号的循环放大检测试剂盒,所述试剂盒包括共价连接有荧光分子与酶底物的水溶性超支化触发式自降解聚合物,和能够将所述酶底物转变为过氧化氢的酶,其中所述超支化触发式自降解聚合物能够在过氧化氢的刺激下释放多个荧光分子与多个酶底物,所述共价连接有荧光分子与酶底物的超支化触发式自降解聚合物的结构如下:
其中S表示酶底物,F表示荧光分子。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中,
所述酶的种类与所述酶底物相对应;其中,S1对应于胆碱氧化酶,S2对应于肌氨酸氧化酶,S3对应于葡萄糖氧化酶,S4对应醇氧化酶。
3.根据权利要求1-2任一项所述的循环放大检测试剂盒,所述试剂盒还包括额外的超支化触发式自降解聚合物2,所述超支化触发式自降解聚合物2共价连接有待分析物响应基元和酶底物,并且能够在待检测物的刺激下脱去响应基元,并释放酶底物,所述共价连接有待分析物响应基元的超支化触发式自降解聚合物2的分子结构如下所示:
其中,AG为待分析物响应基元,为酶底物。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其中,
5.根据权利要求2所述的循环放大检测试剂盒,所述试剂盒还包含额外的酶2,该酶2能够催化前底物分解成酶底物。
6.根据权利要求5所述试剂盒,对于酶底物S1,酶2为乙酰胆碱酯酶,前底物为乙酰胆碱;对于底物S3,酶2为蔗糖酶或碱性磷酸酶,前底物为蔗糖或葡萄糖-6-磷酸。
7.根据权利要求1-2任一项所述的循环放大检测试剂盒,所述试剂盒还包含酶标检测抗体和捕获抗体。
8.根据权利要求1-2任一项所述的循环放大检测试剂盒,所述试剂盒还包含与带正/负电的超支化触发式自降解聚合物静电络合的金纳米粒子,所述超支化触发式自降解聚合物用金纳米粒子代替荧光基团。
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