[发明专利]一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法

权利要求书

1.一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，在发酵培养的过程中，流加补入混合氨基酸母液，所述混合氨基酸母液的成分为L-赖氨酸、L-异亮氨酸、D-谷氨酸、水，当发酵时间为10-13h时，开始流加补入混合氨基酸母液，直至发酵终止，所述混合氨基酸母液的流加速度为每小时流加发酵液体积的0.25%-0.35%，流加总量为发酵液总体积的8%-10%，所述的混合氨基酸母液中以质量体积比计，L-赖氨酸的含量为：4.8%-6%，所述的混合氨基酸母液中以质量体积比计，L-异亮氨酸的含量为：9%-12%，所述的混合氨基酸母液中以质量体积比计，D-谷氨酸的含量为：3%-6%。

2.根据权利要求1所述的一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，具体的操作步骤为：

a、种子培养：将地衣芽孢杆菌菌悬液接种于装有种子培养基的种子罐中，在温度36-38℃、转速590-610 rpm、通气量0.4-0.6 vvm的条件下培养15-17 h，得到种子液；

b、发酵培养：将步骤a中制备的种子液按照体积比10%的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在温度36-38℃、转速590-610 rpm、通气量0.9-1.1 vvm的条件下进行发酵，培养4h后，以0.4L/h的速率匀速流加补料，所述补料的成分及含量以质量体积比计为豆粕粉8%、玉米粉1%、玉米淀粉2%、玉米浆0.5%、葡萄糖6%、余量为水的补料，共流加4L补料，补料结束后控制pH7.0-7.5，39-41 h终止发酵；

c、流加混合氨基酸母液：发酵进行到10-13h后，开始流加混合氨基酸母液，直至发酵终止，得到杆菌肽；

d、检测发酵效价：发酵结束后检测杆菌肽的发酵单位。

3.根据权利要求2所述的一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，所述的步骤a种子培养中种子培养基的成分与用量为：以质量体积比计，黄豆饼粉3%、玉米粉2%、玉米淀粉1%、玉米浆0.5%、硫酸铵0.15%、碳酸钙0.3%，余量为水，调节培养基的pH为6.8。

4.根据权利要求2所述的一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，所述的步骤b发酵培养中发酵培养基的成分与用量为：以质量体积比计，豆粕粉9%、玉米粉2%、玉米淀粉3%、硫酸铵0.3%、硫酸镁0.003%、碳酸钙0.5%，余量为水，调节培养基的pH 为7.2。

5.根据权利要求2所述的一种流加混合氨基酸母液提高杆菌肽效价的方法，其特征在于，所述的步骤b发酵培养中发酵培养基的体积为发酵罐容积的50-80%。