[发明专利]一种合成西那普肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成西那普肽的方法。

背景技术

西那普肽是一种人工设计的21肽，于2012年3月被美国FDA批准上市，临床用于治疗新生儿呼吸窘迫综合征，其氨基酸肽序如下：

H-Lys¹-Leu²-Leu³-Leu⁴-Leu⁵-Lys⁶-Leu⁷-Leu⁸-Leu⁹-Leu¹⁰-Lys¹¹-Leu¹²-Leu¹³-Leu¹⁴-Leu¹⁵-Lys¹⁶-Leu¹⁷-Leu¹⁸-Leu¹⁹-Leu²⁰-Lys²¹-OH

新生儿呼吸窘迫综合征，又称新生儿肺透明膜病，指新生儿出生后不久即出现进行性呼吸困难和呼吸衰竭等症状，主要是由于缺乏肺泡表面活性物质所引起，导致肺泡进行性萎陷，患儿于生后4～12小时内出现进行性呼吸困难、呻吟、发绀、吸气三凹征，严重者发生呼吸衰竭。发病率与胎龄有关，胎龄越小，发病率越高，体重越轻病死率越高。

现有关于西那普肽的合成方法国内外均有报道。美国专利US5260273采用基因工程进行制备，该方法工艺成本较高且繁琐。限制了西那普肽的生产效率。为此，我国专利CN102850440A以及CN104098656A均公开了一种西那普肽的合成方法，以此降低成本和工艺繁琐程度。其中CN104098656A公开的是按照西那普肽C端到N端的肽序逐一合成的技术方案，但是这种合成策略一方面周期长，另一方面总收率较低，为47.9％；CN102850440A公开了一种片段合成策略，但是根据其记载的技术方案合成的多肽和最终的西那普肽并不一致，而且其总收率更低，仅为40％。

不同的合成策略对最终产品的纯度、杂质含量和收率有很大影响，如何在保证纯度和收率的前提下，尽可能的降低合成工艺的复杂程度、杂质以及缩短合成周期，是当下技术人员的研究重点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种合成西那普肽的方法，使得本发明所述方法能够显著提高西那普肽合成的总收率，并保证西那普肽具有较高纯度和较低的单一杂质含量，同时缩短合成周期。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种合成西那普肽的方法，包括以下步骤：

步骤1、将保护的Lys与树脂偶联，获得在Lys的N端及其侧链上偶联有保护基、在其C端偶联有树脂的肽树脂1；

步骤2、将在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶联有保护基的多肽片段1的C端与肽树脂1的N端进行偶联，而后将保护的Lys再与片段1的N端偶联，获得在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列N端、Lys侧链上偶联有保护基，在C端偶联有树脂的肽树脂2；

步骤3、将在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶联有保护基的多肽片段1的C端与肽树脂2的N端进行偶联，而后将保护的Lys再与片段1的N端偶联，获得在SEQ ID NO:3所示氨基酸序列N端、Lys侧链上偶联有保护基，在C端偶联有树脂的肽树脂3；

步骤4、将在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶联有保护基的多肽片段1的C端与肽树脂3的N端进行偶联，而后将保护的Lys再与片段1的N端偶联，获得在SEQ ID NO:4所示氨基酸序列N端、Lys侧链上偶联有保护基，在C端偶联有树脂的肽树脂4；

步骤5、将在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶联有保护基的多肽片段1的C端与肽树脂4的N端进行偶联，而后将保护的Lys再与片段1的N端偶联，获得在SEQ ID NO:5所示氨基酸序列N端、Lys侧链上偶联有保护基，在C端偶联有树脂的西那普肽树脂；

步骤6、西那普肽树脂酸解脱除C端树脂和所有保护基得到西那普肽粗品，粗品纯化转醋酸盐，获得西那普肽成品。