[发明专利]Hsa‑miR‑3200‑5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用有效
| 申请号： | 201510266985.7 | 申请日： | 2015-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN104878012B | 公开（公告）日： | 2018-03-09 |
| 发明（设计）人： | 肖建如;陈素;矫健;周振华;姜东杰 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hsa mir 3200 制备 早期 诊断 brachyury 阳性 肿瘤 试剂 试剂盒 中的 应用 | ||
1.miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的Brachyury阳性肿瘤是指肺癌。
2.根据权利要求1所述的miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的Brachyury阳性肿瘤是指该肿瘤中Brachyury呈现出高水平的表达。
3.根据权利要求1至2任一所述的miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的试剂是指检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸；所述的试剂盒是指包含检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸。
4.根据权利要求3所述的miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸包括反转录引物、PCR特异性引物。
5.根据权利要求3所述的miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸序列包含如SEQ ID NO:2的序列。
6.根据权利要求4或5所述的miR-3200-5p在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒包括以下组分：
A.Real-Time PCR扩增特异性上游引物，如SEQ ID NO:2所示，1管，10μM浓度，100μL/管；
B.Real-Time PCR扩增通用反向下游引物，如SEQ ID NO:3所示，1管，10μM浓度，100μL/管；
C.正常标准品，1管，10μM浓度，100μL/管。
7.检测miR-3200-5p表达量的寡聚核苷酸序列在制备诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的寡聚核苷酸序列包含如SEQID NO:2的序列，所述的Brachyury阳性肿瘤是指肺癌。
8.根据权利要求7所述的检测miR-3200-5p表达量的寡聚核苷酸序列在制备诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，利用所述的寡聚核苷酸检测miR-3200-5p表达量的方法包括如下步骤：
取样本中的总RNA，加入反转录引物、5×PrimeScript Buffer、PrimeScript RT Enzyme Mix I、RNase Free dH2O反转录成cDNA，应用EASY Dilution稀释试剂盒中的正常标准品，以所反转录的cDNA为模板向反应体系中加入PCR特异性引物，通过反转录联合聚合酶链式反应检测miR-3200-5p的表达量。
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