[发明专利]具有抗耐药性的含三唑结构链接子的组合抗菌肽及其合成方法

说明书

本发明公开了一种含三唑结构链接子的新型组合抗菌肽及其制备方法，属于生化技术领域。本发明以含炔丙基甘氨酸和叠氮基赖氨酸的前体肽为底物，CuSO₄.5H₂O为催化剂，抗坏血酸钠为抗氧化剂，水‑叔丁醇为混合溶剂，采用点击化学的1,3‑偶极环加成反应24~28小时，产生一个1,4‑二取代‑1H‑1,2,3‑三唑结构，将上述前体肽链接而得。通过对常见的标准菌以及临床分离的耐药菌的抗菌实验，表明本发明合成的J‑AR肽和J‑RR肽具有较强的抗菌活性、抗耐药菌活性，同时扫描电镜实验观察侧链链接组合抗菌肽可以引起大肠杆菌菌膜的破坏。因此，本发明公开的含三唑结构链接子的新型组合抗菌肽在制备临床治疗药物方面具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，涉及一种具有很好的抗耐药菌活性的组合抗菌肽，尤其涉及一种具有抗耐药性的含三唑结构链接子的组合抗菌肽及其制备合成方法。

背景技术

近年来，滥用抗生素产生的耐药性问题日益严重，对人类疾病造成了巨大的威胁。寻找新的可替代抗生素的新药迫在眉睫。抗菌肽（Antimicrobial peptides），是生物体经诱导产生的一类具有抗菌活性的小分子多肽，来源广泛，其分子量小，大约在 3~6 kD 之间，有耐热、 耐酸性强，水溶性好，快速的杀菌能力等特点（Hancock REW， Scott MG. ProcNatl AcadSci USA，2000，97（16）：8856~ 8861）。抗菌肽的抗菌机制不同于普通抗生素，抗菌机制一般包括①快速破坏菌膜，使菌体内容物泄露，细菌死亡②抗菌肽与细菌细胞内容物（如DNA或RNA）作用，干扰细菌细胞正常的合成和代谢，导致菌体死亡（刘立伟，邓磊. 抗菌肽作用机制研究进展[J].河北化工，2012,35（7）：13-15）。所以，抗菌肽不易诱导耐药性的产生，使其成为生物医药领域的热门研究内容。但是，部分天然抗菌肽也存在抗菌活性弱，对耐药菌作用无效等缺点，将限制抗菌肽的发展。

点击化学主要用于研发和制造可用于医学诊断和新药开发的新型生化标记物。目前，它被认为是一项非常理想的技术，已经被应用于药物开发。点击化学的代表是Cu催化的叠氮基和炔基的1,3-偶极环加成反应。产物有1,4-二取代-1,2,3-三唑结构，其中1,4-二取代-1,2,3-三唑结构被认为是一种新型的药效团，有极大地潜力可以将其运用到抗癌，抗菌，HIV酶抑制剂等研究中（Agalave SG, Maujan SR, Pore VS，et al.Click chemistry: 1,2,3-triazoles as pharmacophores[J].Chem Asian J，2011，6(10)：2696-2718.）。有报道将抗菌肽以点击化学的方法进行侧链连接有助于提高抗菌肽对细胞膜的穿透能力（Christopher J.etal, Enhanced Membrane Pore Formation by Multimeric/Oligomeric Antimicrobial Peptides,Biochemistry 2007, 46, 13437-13442）。因此，我们采用点击化学的方法，用1,2,3-三唑结构作为链接子，侧链链接抗菌肽，合成出抗菌活性增强的新型组合抗菌肽，以期具有良好的抗耐药菌活性，扩宽抗菌谱的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有新型结构的含三唑结构链接子的组合抗菌肽；

本发明的另一目的是提供一种上述含三唑结构链接子的组合抗菌肽的合成方法。

一、具有抗耐药性的含三唑结构链接子的组合抗菌肽

本发明具有抗耐药性的组合抗菌肽的结构式如下所示：

或

二、具有抗耐药性的含三唑结构链接子的组合抗菌肽的制备