[发明专利]基于芯片进行规模化快速制备单根寡核苷酸的方法

权利要求书

1.一种高通量合成和纯化寡核苷酸的方法，所述方法包括以下步骤：

1)设计寡核苷酸序列，在寡核苷酸两端加上通用引物，以将合成的全部寡核苷酸分成若干亚库，不同亚库具有不同的通用引物，同一亚库具有相同通用引物，所述通用引物上含有IIS型内切酶的酶切位点；

2)进行基于微芯片的DNA原位合成，并洗脱合成产物；

3)利用所述通用引物对所述合成产物进行PCR扩增；

4)分离扩增产物；

其中

每个亚库含有5-11根长度不同的寡核苷酸；并且

每个亚库中相邻长度的寡核苷酸相差至少4个碱基的长度，

所述亚库以要合成的寡核苷酸片段大小来分配，

在寡核苷酸和一侧的通用引物之间还具有接头序列，

所述接头序列含有IIS型内切酶的酶切位点。

2.根据权利要求1所述的方法，步骤4)中的分离使用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行。

3.根据权利要求1所述的方法，所述方法在步骤4)后还包括用IIS型内切酶酶切和/或用相应通用引物选择性PCR扩增分离后的独立寡核苷酸的步骤。

4.根据权利要求1所述的方法，所述IIS型内切酶是内切酶Sch I，Bbs I或Bsa I。

5.根据权利要求1所述的方法，所述微芯片是4k芯片。