[发明专利]重组病毒的稳定制剂

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2006年11月15日，申请号为200680051299.7，发明名称为“重组病毒的稳定制剂”。

发明领域

本发明涉及用于例如疫苗或其它药物或研究用途的病毒制品，使这种制品稳定的方法和生产这些制品的方法，以及它们的用途，例如作为疫苗或病毒载体。

发明背景

已经知道生产用于疫苗和其它目的的活病毒制品的多种方法。而且还知道为了保持活性而用于实验室或疫苗用途的冷冻、冻干或其它保存活病毒制品的制剂和方法。

通常，重组病毒以冷冻干燥小糖丸(freeze-dried pellet)保存，其中含有蔗糖、酪蛋白和/或胶原水解产物的磷酸缓冲生理盐水(PBS)。然后这些小糖丸在药学上可接受的溶液(例如0.4-0.9％NaCl)中再水化。然而，却存在与这种制剂有关的重大缺点并且为本领域所知。在这些缺点中包括使用了动物源性物质、不完全确定的成分、复杂的制备方法、高成本和不能保持某些所需的病毒特性。

本领域需要适于制备稳定的病毒制品以用于免疫制剂和疫苗的制剂。需要提供保持病毒所需特性(包括病毒存活力和感染力)的稳定制剂(stabilizing formulation)，即免疫制剂或疫苗。另外，出于对有关动物传播疾病的考虑，本领域需要不是由动物类型产品得到的稳定制剂，还需要提供滴度高、体积小、适于快速冷冻干燥处理的制剂。本申请提供了这样的制剂及其使用方法。

附图简述

图1.在不同温度下，对液体制剂与本发明一个实施方案的新的冻干制剂F12(FD)进行的重组病毒制品稳定性比较。在规定时间测定每种病毒制剂的感染滴度(CCID₅₀)。

发明概述

本发明提供用于保存病毒(例如病毒载体)并且具有各种用途的稳定制剂，包括免疫制剂和疫苗。在一个实施方案中，本发明制剂包含糖、防腐剂、分散剂、热稳定剂、缓冲剂和最多3种不同类型的氨基酸(即1、2或3种不同类型的氨基酸)。在一个实施方案中，本发明制剂包含3种不同类型的氨基酸。在另一个实施方案中，本发明制剂包含2种不同类型的氨基酸。在另一个实施方案中，本发明制剂仅包含一种类型的氨基酸。优选的氨基酸是精氨酸、丙氨酸、丝氨酸或甘氨酸。另外优选的氨基酸是精氨酸、丝氨酸或甘氨酸。将病毒加到稳定制剂中，在所需时间内保持可测量的具体特性(例如存活力、感染力)。优选的制剂在病毒存在的特定条件下保持某些所需的可测量特性，例如有利的外观和溶解时间，下面将予以描述。本发明的其它实施方案从所附说明书、实施例和权利要求书来讲是显而易见的。

发明详述

通常，重组病毒(例如禽痘病毒ALVAC)作为冷冻干燥小糖丸保存，其中含有蔗糖、酪蛋白和/或胶原水解产物的磷酸缓冲生理盐水(PBS)。然后这些小糖丸在药学上可接受的溶液(例如0.4-0.9％NaCl)中再水化。然而，却存在与这种制剂有关的重大缺点，而且是本领域已知的难以克服的困难。因此，本发明所提供的是如下所述的新的稳定制剂。

本发明提供用于稳定地贮藏和保存病毒的制剂，包括用作表达载体的重组病毒、免疫制剂和/或疫苗。所述制剂可用于制备、保存和使用这些病毒的方法中，与现有的制剂相比，制备、保存和使用起来较为容易，成本较低而且病毒活性没有显著降低。这些制剂可称为“稳定制剂”，通常包括糖(例如蔗糖或山梨糖醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖)、防腐剂(可以是糖、氨基酸、其它组分)、分散剂(例如聚乙烯吡咯烷酮40、葡聚糖、PEG)、热稳定剂(例如尿素)、缓冲剂(例如三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)、磷酸缓冲盐溶液(PBS)、磷酸钠、乙酸盐、硼酸盐、Hepes、MOPS、PEG)和一种或多种氨基酸。

本发明制剂中优选包括不超过1、2、3或4种氨基酸。本领域技术人员应当理解的是，在描述组成时提及的氨基酸不包括在制备后加到制剂中的病毒、佐剂或其它组分内的氨基酸或者从病毒、佐剂或其它组分内中释放出的氨基酸。因此，作为制剂组成部分的所述氨基酸在向制剂中加入病毒或佐剂之前就已存在。