[发明专利]一种雏鹅病毒性肝炎抗体及制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 201510237326.0 申请日: 2015-05-12
公开(公告)号: CN104804084A 公开(公告)日: 2015-07-29
发明(设计)人: 张兴晓;侯艳霞;王秀云;张丽娜;李文超 申请(专利权)人: 鲁东大学
主分类号: C07K16/10 分类号: C07K16/10;C07K16/02;A61K39/42;A61P31/14
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 李素红
地址: 264025 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 病毒性肝炎 抗体 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种雏鹅病毒性肝炎抗体,其特征在于它包括杨树皮类脂0.1~0.3%(重量百分比),鹅源鸭甲型肝炎基因3型病毒高免卵黄抗体,中和效价不低于1:128,泊罗沙姆1880.1~0.2%(重量百分比),硫柳汞0.01%(重量百分比)。

2.权利要求1所述的一种雏鹅病毒性肝炎抗体的制备方法,其特征在于所述抗体的制备方法,步骤如下:

(1)制备卵黄抗体,按照不低于1:4的体积比例混合卵黄抗体和无菌生理盐水,进行匀浆;

(2)在步骤(1)得到的混合液中添加杨树皮类脂,使其终浓度达到0.1~0.3%(重量百分比),充分混合搅拌;

(3)在步骤(2)得到的上述混合液中添加泊罗沙姆188,使其终浓度达到0.1~0.2%(重量百分比);

(4)将步骤(3)得到的混合液在4~8℃冷浸过滤;

(5)步骤(4)得到的滤液经巴氏消毒后加入终浓度为0.01%(重量百分比)的硫柳汞,分装,无菌检验合格备用。

3.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述的步骤(1)卵黄抗体的制备方法:所述的步骤(1)卵黄抗体的制备方法:利用鹅源鸭甲型肝炎基因3型毒株接种SPF鸭胚或非免疫鸭胚或鹅胚,收集60~120小时死亡胚胚体、绒毛膜和尿囊液混合捣碎,冻融三次,离心,取上清液,加终浓度为0.1%(重量百分比)的甲醛灭活;然后与油佐剂充分乳化制成油乳剂灭活疫苗,用于健康产蛋鸡的免疫;首次免疫每只鸡胸部肌肉注射0.5ml弱毒疫苗,14日后进行第二次免疫,每只鸡胸部肌肉注射1.0ml油乳剂灭活苗,21日时进行第3次免疫,每只鸡肌肉注射l.0ml油乳剂灭活苗,28日时进行第4次免疫,每只鸡肌肉注射l.0ml油乳剂灭活苗;于第4次免疫后14日,采集鸡血清测定抗DHAV中和抗体效价,合格者,收集该鸡群产的蛋,自来水清洗污物后用0.05%百毒杀浸泡3~5min,纱布擦干后,再用75%酒精擦一遍,晾干,无菌条件下分离蛋清,把蛋黄倒入消毒好的组织捣碎机中,获得卵黄抗体。

4.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(2)中杨树皮类脂在使用前先过200~300目纱网过滤,然后将滤液转入220~440nm的微孔滤袋中,压力过滤,巴氏灭菌。

5.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(3)中混合液中添加泊罗沙姆188,先将其按照重量比配制成10%的水溶液。

6.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(4)的过滤方法为,100~200目纱网第一次过滤,然后将滤液转入220~440nm的微孔滤袋中,压力过滤。

7.权利要求1-6任何一项所述一种雏鹅病毒性肝炎抗体的使用方法,所述抗体使用时,中和效价不低于1:128,且预防和治疗剂量不低于0.5ml/只。

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