[发明专利]一种雏鹅病毒性肝炎抗体及制备方法和应用无效
| 申请号: | 201510237326.0 | 申请日: | 2015-05-12 |
| 公开(公告)号: | CN104804084A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
| 发明(设计)人: | 张兴晓;侯艳霞;王秀云;张丽娜;李文超 | 申请(专利权)人: | 鲁东大学 |
| 主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C07K16/02;A61K39/42;A61P31/14 |
| 代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 李素红 |
| 地址: | 264025 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 病毒性肝炎 抗体 制备 方法 应用 | ||
1.一种雏鹅病毒性肝炎抗体,其特征在于它包括杨树皮类脂0.1~0.3%(重量百分比),鹅源鸭甲型肝炎基因3型病毒高免卵黄抗体,中和效价不低于1:128,泊罗沙姆1880.1~0.2%(重量百分比),硫柳汞0.01%(重量百分比)。
2.权利要求1所述的一种雏鹅病毒性肝炎抗体的制备方法,其特征在于所述抗体的制备方法,步骤如下:
(1)制备卵黄抗体,按照不低于1:4的体积比例混合卵黄抗体和无菌生理盐水,进行匀浆;
(2)在步骤(1)得到的混合液中添加杨树皮类脂,使其终浓度达到0.1~0.3%(重量百分比),充分混合搅拌;
(3)在步骤(2)得到的上述混合液中添加泊罗沙姆188,使其终浓度达到0.1~0.2%(重量百分比);
(4)将步骤(3)得到的混合液在4~8℃冷浸过滤;
(5)步骤(4)得到的滤液经巴氏消毒后加入终浓度为0.01%(重量百分比)的硫柳汞,分装,无菌检验合格备用。
3.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述的步骤(1)卵黄抗体的制备方法:所述的步骤(1)卵黄抗体的制备方法:利用鹅源鸭甲型肝炎基因3型毒株接种SPF鸭胚或非免疫鸭胚或鹅胚,收集60~120小时死亡胚胚体、绒毛膜和尿囊液混合捣碎,冻融三次,离心,取上清液,加终浓度为0.1%(重量百分比)的甲醛灭活;然后与油佐剂充分乳化制成油乳剂灭活疫苗,用于健康产蛋鸡的免疫;首次免疫每只鸡胸部肌肉注射0.5ml弱毒疫苗,14日后进行第二次免疫,每只鸡胸部肌肉注射1.0ml油乳剂灭活苗,21日时进行第3次免疫,每只鸡肌肉注射l.0ml油乳剂灭活苗,28日时进行第4次免疫,每只鸡肌肉注射l.0ml油乳剂灭活苗;于第4次免疫后14日,采集鸡血清测定抗DHAV中和抗体效价,合格者,收集该鸡群产的蛋,自来水清洗污物后用0.05%百毒杀浸泡3~5min,纱布擦干后,再用75%酒精擦一遍,晾干,无菌条件下分离蛋清,把蛋黄倒入消毒好的组织捣碎机中,获得卵黄抗体。
4.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(2)中杨树皮类脂在使用前先过200~300目纱网过滤,然后将滤液转入220~440nm的微孔滤袋中,压力过滤,巴氏灭菌。
5.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(3)中混合液中添加泊罗沙姆188,先将其按照重量比配制成10%的水溶液。
6.根据权利要求2所述方法,其特征在于所述步骤(4)的过滤方法为,100~200目纱网第一次过滤,然后将滤液转入220~440nm的微孔滤袋中,压力过滤。
7.权利要求1-6任何一项所述一种雏鹅病毒性肝炎抗体的使用方法,所述抗体使用时,中和效价不低于1:128,且预防和治疗剂量不低于0.5ml/只。
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