[发明专利]一种用于检测大肠杆菌的引物及其方法和应用有效
| 申请号： | 201510236760.7 | 申请日： | 2015-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN104862394B | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 毛小琴;刘有福;宋玉竹;牛华;夏雪山 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 谈杰 |
| 地址： | 650500 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 大肠杆菌 引物 及其 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于检测大肠杆菌的引物，包括上游引物和下游引物，其特征在于：所述的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述的下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述用于检测大肠杆菌的引物能快速、简便、准确的检测大肠杆菌。
2.一种检测大肠杆菌的方法，其特征在于：所述检测大肠杆菌的方法不以诊断为目的，
包括以下步骤：
1)提取待检测样品的模板DNA；
2)设计权利要求1所述的引物；
3)PCR扩增：
反应体系：Taq 0.125μL,10×聚合酶缓冲液2.5μL,dNTP 2μL，Mg2+1.6μL，模板1μL，上下游引物各1μL，加ddH2O补足25μL；
反应条件：95℃5min；95℃30s，57℃30s，72℃20s，30个循环；72℃1min；
4)利用琼脂糖凝胶电泳方法判断检测结果。
3.一种用于检测大肠杆菌的试剂盒，其特征在于：包括引物SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2；
10×聚合酶缓冲液2.5μL,dNTP 2μL，Mg2+1.6μL，模板1μL，上下游引物各1μL，ddH2O 25μL。
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