[发明专利]一种同时检测食源性疾病病原菌的试剂盒

权利要求书

1.一种同时检测食源性疾病病原菌的试剂盒，所述食源性疾病病原菌包括沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌、霍乱弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血性弧菌，其特征在于：所述试剂盒包含PCR反应液，所述PCR反应液包括分别独立的第一反应液、第二反应液及稳定剂；其中，所述第一反应液包含分别以SsaR基因(沙门氏菌)、IpaH基因(志贺氏菌)、ydiJ基因(大肠埃希氏菌)、ToxR基因(副溶血性弧菌)、hlyA基因(霍乱弧菌)和gytB基因(小肠结肠炎耶尔森菌)为靶基因、并用于荧光定量PCR的SsaR、IpaH、ydiJ、ToxR、hlyA和gytB基因的引物探针。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测食源性疾病病原菌的试剂盒，其特征在于：

所述SsaR基因的引物探针为：

SsaR基因的引物:

1F:5’—GAACCTGGCCTGAAGACATAAA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，

1R:5’—AGGTCAATAGCCAGAAAGGGA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:2所示，

SsaR基因的探针：

1A:5-(FAM)CCGGCTAACTGACTCACCGTAAATGCCGG(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:3所示；

1H:5-(HEX)CCGGCTAACTGACTCACCGTAAATGCCGG(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:4所示；

所述IpaH基因(志贺氏菌)的引物探针为：

IpaH基因的引物:

2F:5’—TGAAGGAAATGCGTTTCTATG—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:5所示，

2R:5’—AGGGAGAACCAGTCCGTAAA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:6所示，

IpaH基因的探针：

2A:5’-(FAM)CACGGCCGAAGCTATGGTCAGAAGCCGTG(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:7所示；

2X:5’-(ROX)CACGGCCGAAGCTATGGTCAGAAGCCGTG(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:8所示；

所述ydiJ基因(大肠埃希氏菌)的引物探针为：

ydiJ基因的引物:

3F:5’—ATTTGGCGAAAATGGCAGTAAC—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:9所示，

3R:5’—CAGCTATTACGATGCGCAAGTG—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:10所示，

ydiJ基因的探针：

3A:5’-(FAM)GGAAACCTAATTTTTCGACCAGACGGA(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:11所示；

3Y5:5’-(CY5)GGAAACCTAATTTTTCGACCAGACGGA(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:12所示；

所述ToxR基因(副溶血性弧菌)的引物探针为：

ToxR基因的引物:

4F:5’—GAAGTTGTACGATTAGGAAGC—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:13所示，

4R:5’—TGCTCACGCCAAACAAAC—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:14所示，

ToxR基因的探针：

4H:5’-(HEX)CCGCCCGTATACTCCTGATGTTGGCGG(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:15所示；

4X:5’-(ROX)CCGCCCGTATACTCCTGATGTTGGCGG(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:16所示；

所述hlyA基因(霍乱弧菌)的引物探针为：

hlyA基因的引物:

5F:5’—GCTTTATTGTTCGATGCGTTAAAC—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:17所示，

5R:5’—GATGCCAAAATTGTGCGTATCA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:18所示，

hlyA基因的探针：

5H:5’-(HEX)TCTTGGGCAATCGCATCGGTTGA(BHQ1)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:19所示；

5Y5:5’-(CY5)TCTTGGGCAATCGCATCGGTTGA(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:20所示；

所述gytB基因(小肠结肠炎耶尔森菌)的引物探针为：

gytB基因的引物:

6F:5’—AAGAAGGCCTTCGGGTTGTAA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:21所示，

6R:5’—TTCTGCGAGTAACGTCAATCACA—3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:22所示，

gytB基因的探针：

6X:5’-(ROX)ATTAACCTTTATGCCTTCCTCCTCGCTG(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:23所示；

6Y5:5’-(CY5)ATTAACCTTTATGCCTTCCTCCTCGCTG(BHQ2)-3’，其核苷酸序列如SEQIDNO:24所示。