[发明专利]一种离子束注入诱变选育蛹虫草菌株的方法和所育菌株有效
| 申请号: | 201510229665.4 | 申请日: | 2015-05-07 |
| 公开(公告)号: | CN104885931B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
| 发明(设计)人: | 刘桂君;尚宏忠;周思静;顾海科;王平;杨素玲;孟佑婷;郑洁;张丰收 | 申请(专利权)人: | 北京市辐射中心 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01H1/06;A01H15/00;A01G1/04 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100875 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 离子束 注入 诱变 选育 虫草 菌株 方法 | ||
1.一株蛹虫草菌株(Cordyceps militaris),于2014年10月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.9818。
2.权利要求1所述蛹虫草菌株CGMCC No.9818在液体发酵生产虫草素及菌丝体中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,液体发酵的培养条件包括:首先在25-28℃的恒温条件下,在液体发酵培养基中以150-180r/min的转速摇床培养5-7d,然后于25℃光照培养箱中静置培养20-30d获得含虫草素的培养液。
4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于,液体发酵培养基的组成成分包括:蔗糖10-30g/L,蛋白胨10-30g/L,磷酸二氢钾0.5-2.0g/L,硫酸镁0.5-1.0g/L。
5.权利要求1所述的蛹虫草菌株CGMCC No.9818在固体培养生产虫草素中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述固体培养中所使用的固体培养基由培养基质和营养液组成,其中,培养基质选自燕麦、大米、大麦、小麦、小米和高粱中的至少一种;营养液的组成成分包括:葡萄糖5-30g/L,蛋白胨1-30g/L,酵母粉1-10g/L,磷酸二氢钾0.5-2g/L,硫酸镁0.5-1.0g/L。
7.根据权利要求5或6所述的应用,其特征在于,相对于100g的培养基质,营养液的用量为120mL-140mL。
8.一种离子束注入诱变选育蛹虫草菌株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将蛹虫草固体菌种在25℃恒温条件下以150r/min的转速摇床培养7d获得液体培养物,用200目细胞筛过滤所述液体培养物得到孢子悬液,以液体培养基为稀释剂稀释100倍获得浓度为3.6×105个/mL的孢子悬液,吸取0.1mL稀释后的孢子悬液涂布到金属培养皿上,无菌风吹干后在2-8h内做离子束注入诱变。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,在真空度为10-3Pa条件下,采用连续注入方式对金属培养皿上的蛹虫草孢子进行N+离子束注入诱变,能量为30kev,剂量为3×1014ions/cm2-6×1014ions/cm2,获得诱变后的蛹虫草孢子。
10.权利要求8或9所述的方法在诱变选育蛹虫草菌株中的应用。
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