[发明专利]基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条

权利要求书

1.基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：包括PVC底板(1)、样品垫(2)、玻璃纤维垫(3)、包被C线(6)以及T线(7)的硝酸纤维素膜(4)、吸水垫(5)；

在PVC底板(1)的上表面固定设置硝酸纤维素膜(4)，在硝酸纤维素膜(4)的两侧分别设有玻璃纤维垫(3)和吸水垫(5)；除玻璃纤维垫(3)的右端下表面与硝酸纤维素膜(4)的左端上表面固定相连之外，玻璃纤维垫(3)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连；除吸水垫(5)的左端下表面与硝酸纤维素膜(4)的右端上表面固定相连之外，吸水垫(5)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连；在玻璃纤维垫(3)的左侧还设有样品垫(2)，除样品垫(2)的右端下表面与玻璃纤维垫(3)的左端上表面固定相连之外，样品垫(2)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连。

2.根据权利要求1所述的基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：

玻璃纤维垫(3)中包被有偶联了特异性抗体Ⅰ的供体微球；

玻璃纤维垫(3)的制备方法为：

将偶联了特异性抗体Ⅰ的供体微球用释放缓冲液稀释至浓度为80～100ug/ml，喷至玻璃纤维垫(3)上，用量为：1～5ul/cm；

所述释放缓冲液为：在100ml的10～100mmol/L、pH 7.4的磷酸盐缓冲液或硼酸盐缓冲液中，加入10～40g蔗糖、3～10g海藻糖、0.5～1g的N，O-双三甲硅基乙酰胺、0.2～0.5g庆大霉素；

硝酸纤维素膜(4)的制备方法为：

将偶联了特异性抗体Ⅱ的受体微球用分析缓冲液稀释至浓度为200～300ug/ml，然后喷至硝酸纤维素膜(4)的T线(7)位置；用量为：1～1.5ul/cm；

将偶联了能与所述特异性抗体Ⅰ相结合的特异性抗体Ⅲ的受体微球用分析缓冲液稀释至浓度为200～300ug/ml，然后喷至硝酸纤维素膜(4)的C线(6)位置；用量为：1～1.5ul/cm；

所述分析缓冲液为：在100ml的25mM、pH7.4的HEPES缓冲液中加入100～500mg的Dextran-500，加入NaCl直至其浓度为10～100mM、加入0.1～1g的BSA、0.01～0.05g的牛γ-球蛋白、0.001～0.5g的Tween-20、0.01～0.05g的Proclin-300；

所述特异性抗体Ⅰ和特异性抗体Ⅱ均能与待测蛋白特异性结合，且结合在待测蛋白质的不同表位。

3.根据权利要求2所述的基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：

特异性抗体Ⅰ和特异性抗体Ⅱ为以下任意一种：

兔、羊、鸡来源的抗待测蛋白质的多抗，或者鼠、兔来源的抗待测蛋白质的单克隆抗体。

4.根据权利要求2或3所述的基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：

所述玻璃纤维垫(3)中：

所述供体微球为酞菁颗粒；

所述特异性抗体Ⅰ为兔抗人心肌肌钙蛋白cTnI抗体、鼠抗人C反应蛋白(CRP)单克隆抗体1；

硝酸纤维素膜(4)中：

特异性抗体Ⅱ为：鼠抗人心肌肌钙蛋白cTnI单克隆抗体、鼠抗人C反应蛋白(CRP)单克隆抗体2；

特异性抗体Ⅲ为：羊抗兔IgG多克隆抗体、羊抗鼠IgG多克隆抗体；

受体微球为：聚苯乙烯微球。

5.根据权利要求4所述的基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：

玻璃纤维垫(3)的制备方法中：将偶联了兔抗人心肌肌钙蛋白cTnI抗体的供体微球用释放缓冲液混合稀释到80ug/ml，喷至玻璃纤维垫(3)上，用量为1ul/cm；

硝酸纤维素膜(4)的制备方法中：将偶联了鼠抗人心肌肌钙蛋白cTnI单克隆抗体的受体微球用分析缓冲液稀释到200ug/ml，喷至硝酸纤维素膜(4)的T线(7)位置，用量为1ul/cm；将偶联了羊抗兔IgG多克隆抗体的受体微球用分析缓冲液稀释到200ug/ml，喷至硝酸纤维素膜(4)的C线(6)位置，用量为1ul/cm。

6.根据权利要求5所述的基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：

所述释放缓冲液为：在100ml的20mmol/L、pH 7.4的的磷酸盐缓冲液中加入30g蔗糖、5g海藻糖、0.5g的N，O-双三甲硅基乙酰胺、0.3g庆大霉素；

所述分析缓冲液的制备方法为：在100ml的25mM，pH7.4的HEPES缓冲液中加入200mg的Dextran-500，加入NaCl直至其浓度为50mM、加入0.5g的BSA、0.02g的牛γ-球蛋白、0.1g的Tween-20、0.01g的Proclin-300。