[发明专利]一种樱桃砧木M9的组培快速育苗方法

说明书

技术领域

    本发明涉及一种樱桃砧木M9的组培快速育苗方法。

背景技术

目前，樱桃属于蔷薇科落叶乔木果树，成熟时颜色鲜红，玲珑剔透，味美形娇，树姿优美，富含糖和铁质，营养丰富，是重要的果树和园林绿化树，又具有很高的食用和药用价值，近年来在我国广泛栽培，发展潜力巨大。

目前，樱桃的生产中主要采用扦插、压条和分根蘖繁殖，不但繁殖系数低，而且造成品种退化，病虫害传播蔓延。采用组织培养技术可以快速繁殖作物新品种，加快新品种的推广速度，同时植物组织培养培育的组培苗，遗传基因高度一致，生产稳定，苗木品质性能好，能为产业化生产提供优质的苗木。

目前，樱桃组培工厂化育苗的技术问题还没完全解决，采用MS 培养基樱桃组培苗继代增殖培养时，常出现以下问题：组培生根苗基部愈伤组织膨大，组培苗生长势弱、叶片大、茎矮小、节间伸长生长慢、增殖系数低等现象等。

发明内容

本发明的目的是提供一种樱桃砧木M9的组培快速育苗方法，解决种樱桃组培阶段节间伸长生长慢、增殖系数低的问题。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种樱桃砧木M9的组培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 获取无菌材料：

于春季剪取樱桃新萌发的小芽，用75％的乙醇浸泡20-30s清洗材料后，在纯净水中浸泡15-20分钟后于超净工作台上，再用吸水纸吸小芽体干表面水分；

(2) 樱桃的初代培养：

取小芽基部，切成lcm 长的小段，接种到小芽诱导培养上，所述的小芽诱导培养基的成分为：MN+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D +0.2 mg/L NAA+ 30 g/L 白糖＋ 6g/L 琼脂粉，小芽接种于小芽诱导培养基19天后，进行继代增殖培养；

(3) 樱桃的增殖培养：

将带有愈伤组织的芽接种于pH 值为5.8-6.2 的不定芽增殖培养基上进行增殖培养，所述的增殖培养基的成分为硝酸钾0.3mg/L+磷酸二氢钾0.1mg/L+硫酸镁0.2mg/L+碘化钾0.2mg/L硫酸锌0.3mg/L+钼酸钠0.1mg/L+硫酸亚铁0.5mg/L+盐酸吡哆醇0.2mg/L+烟酸0.1mg/L+吲哚乙酸0.2mg/L +6-BA1.0-3.0mg/L+ 蔗糖30g/L+ 琼脂6g/L，其中，先进行暗处理1 周，再给予每日光照16h，增殖培养的培养温度为24-26℃；

(4) 生根壮苗培养：

在不定芽增殖培养基中诱导出丛生芽后，将丛生芽分成小丛或单芽并接种于pH 值为5.8-6.2 的生根壮苗培养基中，所述的生根壮苗培养基的成分为0.2mg/LIBA+NAA0.5-1.0mg/L+IBA2.0-6.0mg/L+ 蔗糖30g/L+ 琼脂6g/L，进行生根和壮苗培养；

(5) 驯化移栽：

当根长为2-4cm 时，进行驯化移栽，将培养瓶移至大棚内炼苗6-10 天，洗去培养基，将根部浸泡5％高锰酸钾溶液进行消毒，移栽入穴盘中， 1 周后除去薄膜，给予全光照，进行肥水管理。

有益效果：本发明由于采用在M9培养基的基础上，通过调整大量元素的种类和浓度以及优化激素调控琼脂浓度等，为樱桃桃组培苗继代增殖提供了均衡合理的营养需求，保证了其快速、高效、健壮生长，生根系数高，有效的促进了节间伸长，提高了增殖系数。

具体实施方式                   

实施例：

一种樱桃砧木M9的组培快速育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 获取无菌材料：

于春季剪取樱桃新萌发的小芽，用75％的乙醇浸泡20-30s清洗材料后，在纯净水中浸泡15-20分钟后于超净工作台上，然后用吸水纸吸小芽体干表面水分；

(2) 樱桃的初代培养：

取小芽基部，切成lcm 长的小段，接种至小芽诱导培养上，所述的小芽诱导培养基的成分为：MN+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D +0.2 mg/L NAA+ 30 g/L 白糖＋ 6g/L 琼脂粉，小芽接种于小芽诱导培养基19天后，进行继代增殖培养；

(3) 樱桃的增殖培养：