[发明专利]还原制备顺式3,5‑二羟基己酸酯化合物的方法及菌种有效

专利信息
申请号: 201510195502.9 申请日: 2015-04-23
公开(公告)号: CN104789505B 公开(公告)日: 2018-03-06
发明(设计)人: 余宏;陈涛;王波 申请(专利权)人: 苏州东和盛昌生物科技有限公司;余宏
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P7/62;C12R1/01
代理公司: 南京苏科专利代理有限责任公司32102 代理人: 黄春松
地址: 215600 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 还原 制备 顺式 羟基 己酸 酯化 方法 菌种
【权利要求书】:

1.一种产羰基还原酶的菌株,其特征在于:所述菌株为一种红球菌属的菌株(Rhodococcus sp. )的菌株 SG-1,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国,武汉,武汉大学,430072,保藏编号CCTCC NO:M2014636,保藏时间2014年12月7日。

2.如权利要求1所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:以上所述的一种产羰基还原酶的菌株应用于5-羟基-3-氧代己酸酯对映体的还原制备顺式3,5-二羟基己酸酯化合物中。

3.如权利要求2所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:所述还原制备包括如下步骤:

以5-羟基-3-氧代己酸酯对映体为底物,以产羰基还原酶的菌株在培养基中经培养获得的羰基还原酶为催化剂,在PH=5-8、浓度为0.01-1.0mol/L的缓冲液中进行5-羟基-3-氧代己酸酯对映体的还原,反应结束后经有效转化得到顺式3,5-二羟基己酸酯,所述反应条件控制在20-35℃,维持PH=7,反应时间控制在48-96小时之间。

4.如权利要求3所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:所述缓冲液的PH=6.5-7.5,浓度为0.05-0.2mol/L,反应条件控制在25℃,反应时间为72小时。

5.如权利要求3所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:所述缓冲液为三乙醇胺与氯化物的复合缓冲液、磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液、磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲液。

6.如权利要求3所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:所述缓冲液中还添加有还原性二型辅酶。

7.如权利要求3所述的一种产羰基还原酶的菌株的应用,其特征在于:所述产羰基还原酶的菌株在培养基中,在30℃,200r/min,培养24h,将得到的培养物按5%的体积比转接到相同组分的新鲜培养基中继续培养12小时,经多次传代培养,并经过0.1mol/L的磷酸缓冲液洗涤2次,获得含羰基还原酶菌体的细胞,所述培养基调节至PH为6.5-7.5,所述培养基的浓度,组成如下:

组分浓度,以毫克/升计 硫酸铵2500磷酸氢二钠2200磷酸二氢钾1100氯化钠2800六水氯化镁4005-羟基-3-氧代己酸酯1000生物素0.002二水氯化钙12盐酸吡哆醛0.01核黄素0.005泛酸0.005氨基苯甲酸0.005叶酸0.002维生素B120.005七水硫酸锌0.1四水氯化锰0.06硼酸0.25六水氯化钴0.01二水钼酸钠0.02六水氯化镍0.01七水硫酸亚铁0.002

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