[发明专利]乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201510190266.1 | 申请日： | 2015-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN104744594B | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 刘东;刘威;吴玉章 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/29;A61K47/42;A61P31/20 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 王贵君 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乙肝病毒 多表位 毒素 融合 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白在制备乙肝治疗性疫苗中的应用，其特征在于：氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.根据权利要求1所述的应用，特征在于：所述乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白由以下步骤制备：将核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白的编码 基因克隆入质粒pET300中，获得重组表达载体pET300-STXB-EP；将重组表达载体 pET300-STXB-EP转化大肠杆菌BL21(DE3)，用终浓度为1mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷于温度37℃诱导表达4小时，收集菌体，超声破碎，离心取上清，用Ni2+亲和层析 柱纯化，用TEV蛋白酶酶切去除His和Sumo标签，再过葡聚糖凝胶G75分子筛纯化，即得乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白。
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