[发明专利]一种庆大霉素的磁免疫化学发光检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种庆大霉素的磁免疫化学发光检测试剂盒，其特征在于包括的试剂有：酶标抗原，酶标抗原稀释液，磁标抗体，磁标抗体稀释液，庆大霉素系列标准品溶液，化学发光底物A、B液，浓缩复溶液，浓缩洗涤液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述酶标抗原是辣根过氧化物酶标记的庆大霉素半抗原的标记物，庆大霉素半抗原是用重铬酸吡啶将庆大霉素原药中的醇羟基氧化成酮基，得到单酮基庆大霉素，然后单酮基庆大霉素与对甲酸苯肼进行缩合反应，得到带有羧基的庆大霉素半抗原产物。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述磁标抗体是庆大霉素单克隆抗体与磁珠偶联得到。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述磁珠表面含有-OH、-COOH或-NH₂活性基团。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述庆大霉素单克隆抗体是由庆大霉素半抗原与牛血清白蛋白得到的偶联物作为免疫原免疫Balb/c小鼠制备获得。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述化学发光底物A液为含有鲁米诺和对甲苯酚的三羟甲基氨基甲烷的溶液。化学发光液B液为含有柠檬酸、无水Na₂HPO₄和CO(NH2)2·H₂O₂的水溶液。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括标准品溶液、浓缩复溶液和浓缩洗涤液。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于可以配套化学发光检测仪检测庆大霉素的残留量。

9.一种利用权利要求1～8任一项所述的试剂盒检测庆大霉素的方法，包括下列步骤：

1)将酶标抗原与酶标抗原稀释液按照1:10～1:20的体积比进行稀释，装入化学发光检测仪酶标抗原工作液容器中；

2)将磁标抗体与磁标抗体稀释液按照1:10～1:20的体积比进行稀释，装入化学发光检测仪磁标抗体工作液容器中；

3)化学发光检测仪分别吸取30μL～60μL酶标抗原、30μL～60μL样品提取液和30μL～60μL磁标抗体，依次加入到反应杯存储装置中，在室温下反应15min，再通过清洗装置进行磁分离2min～4min，弃上清液后用洗涤液300μL～500μL对复合物沉淀清洗3次～5次；

4)将分离好的复合物放入测量暗箱，加入化学发光底物A液和B液各50μL，检测发出的相对光强度(RLU)，样品中庆大霉素的含量与RLU成负相关关系，可以通过RLU标准曲线计算庆大霉素的残留浓度。