[发明专利]从血浆制备富含IgG的组合物的方法

权利要求书

1.一种方法，包括下列步骤：

(a)在第一沉淀步骤中，用介于6％至10％之间的乙醇，在介于6.7至7.3之间的pH值下，使减少冷冻沉淀物的血浆组分沉淀，以获得富含IgG的上清液；

(b)在-5℃至-9℃的温度下和在介于6.7至7.3之间的pH值下，用介于20％至30％之间的乙醇使IgG从所述上清液中沉淀，以形成第一沉淀物；

(c)使步骤(b)中形成的所述第一沉淀物再悬浮，以形成悬浮液；

(d)用洗涤剂处理步骤(c)中形成的悬浮液；

(e)用介于20％至30％之间的乙醇，在介于6.7至7.3之间的pH值下，使IgG从所述悬浮液中沉淀，以形成第二沉淀物；

(f)使步骤(e)中形成的所述第二沉淀物再悬浮，以形成悬浮液；

(g)用溶剂和/或洗涤剂处理步骤(f)中形成的悬浮液；和

(h)实施至少一次离子交换色谱分级分离由此制备含有浓缩IgG的组合物，

其中，在步骤(d)之前，将介于0.02kg/kg在步骤(b)中形成的第一沉淀物至0.06kg/kg在步骤(b)中形成的第一沉淀物之间的烟雾二氧化硅与步骤(c)中形成的悬浮液混合孵育并过滤所述溶液。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中，在添加乙醇之前或同时，使溶液冷却至-7℃至-9℃的温度。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中的乙醇浓度为23％至27％。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中的乙醇浓度为24％至26％。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中的乙醇浓度为25％。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(b)中，在添加乙醇之后，立即将溶液的pH调节至6.8至7.0。

7.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(b)中，在添加乙醇之后，立即将溶液的pH调节至6.9。

8.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(b)的沉淀孵育期中使溶液的pH连续维持在6.8至7.0。

9.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(b)的沉淀孵育期中使溶液的pH连续维持在6.9。

10.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中使用如下比率的冷提取缓冲液使沉淀物再悬浮：1份沉淀物比8至30份提取缓冲液。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中使用如下比率的冷提取缓冲液使沉淀物再悬浮：1份沉淀物比15份提取缓冲液。

12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述提取缓冲液的pH值为4.5至5.0。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述提取缓冲液含有5mM磷酸二氢钠、5mM乙酸盐和0.051％至0.06％冰乙酸(v/v)。

14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述提取缓冲液在4.5的pH值下和在0.7至0.9mS/cm的电导率下含有5mM磷酸二氢钠和5mM乙酸盐。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述混合孵育包含孵育40至80分钟的时期，在此期间持续混合悬浮液。

16.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述混合孵育在2℃至8℃的温度下实施。