[发明专利]一种可控性的核酸抽提法在审
| 申请号: | 201510153982.2 | 申请日: | 2015-04-02 |
| 公开(公告)号: | CN104974999A | 公开(公告)日: | 2015-10-14 |
| 发明(设计)人: | 邓亚光;邓伟平 | 申请(专利权)人: | 武汉格蓝丽富科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人: | 刘杰 |
| 地址: | 430075 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 可控性 核酸 提法 | ||
1.一种可控性的核酸抽提法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将特殊标记的核酸探针加入需要抽提核酸的试样中,让所述核酸探针与所述试样中的核酸相结合;
(2)将可以与上述(1)中的核酸探针相结合的修饰磁珠加入到步骤(1)所述的试样中,使所述核酸探针的标记部位与磁珠表面的修饰物相结合;
(3)用磁场吸附和收集上述磁珠,从而所述试样中的核酸样本也得到富集、分离和抽提;
(4)将核酸样本从磁珠或磁铁上释放出来,用于各种核酸检测和分析。
2.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述特殊标记的核酸探针在普通的核酸探针上加上一个或多个特定的化学分子结构。
3.根据权利要求2所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述特定的化学分子结构是可以和磁珠或磁珠表面的修饰物在一定的条件下相结合的;所述特定的化学分子结构为生物素(Biotin),可以和磁珠表面的亲和素(Strepavidin)稳定结合。
4.根据权利要求2或3所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述特殊标记的核酸探针包括脱氧核糖核酸、核糖核酸探针及两者的杂交结构、或生物代替物的探针,探针序列包括随机探针序列和特异性核酸探针序列。
5.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述试样包括血清、血浆、体液、各种试剂液或由细胞或组织由来的细胞裂解液。
6.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述核酸探针与所述试样中的核酸相结合适合有高温处理,酸碱处理以及急速冷却处理,结合稳定并有特异性等特点。
7.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述磁珠表面修饰物指的是能和探针标记物相结合的分子结构,包括亲和素(Strepavidin),该种结合是可以在一定条件(酶处理,高温处理和试剂处理)下分开。
8.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述磁场包括使用电磁铁、永久磁铁或两者兼用。
9.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述步骤(4)的从磁铁或磁珠上释放核酸产物或解除标记分子和磁珠表面修饰分子之间的结合的方法,包括酶切反应,加温和试剂处理。
10.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述步骤(4)从磁铁上,释放磁珠或核酸时,可在磁铁上套上非磁性套,使要捕获的磁珠体,先结合在插有磁铁的塑料套表面,当抽去磁铁后,磁珠体就容易释放下来。
11.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,所述试样中的核酸包括使用标记的随机核酸探针抽提全脱氧核糖核酸,全核糖核酸以及小分子核糖核酸,使用标记的特殊核酸序列结构的定位核酸探针抽提特定基因或相应核酸序列结构的目标核酸,包括大分子和小分子核酸分子。
12.根据权利要求1所述的可控性的核酸抽提法,其特征在于,使用特殊核酸序列结构的定位核酸探针,可以从抽提好的核酸试样中,浓缩所需核酸。
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