[发明专利]用于鉴定11个北京地方枣品种的引物及其应用有效
申请号: | 201510140984.8 | 申请日: | 2015-03-27 |
公开(公告)号: | CN104726598B | 公开(公告)日: | 2017-03-01 |
发明(设计)人: | 张铁强;胡灿丽;李子龙;雷慧;王志忠;马萱 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅,白艳 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 11 北京 地方 品种 引物 及其 应用 | ||
1.如下1)-4)中任一所述物质在鉴定或辅助鉴定待测枣为北京地方枣品种中的应用:
1)引物对,所述引物对由序列表中序列1所示的引物1和序列表中序列2所示的引物2组成;
2)成套引物,所述成套引物由所述引物对和荧光引物,所述荧光引物的核苷酸序列为序列表中序列3;
3)含有所述引物对或所述成套引物的PCR试剂;
4)含有所述引物对或所述成套引物的试剂盒。
2.权利要求1中的所述物质在区分或辅助区分北京地方枣品种中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述荧光引物5’末端标记荧光基团。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于:
所述北京地方枣品种为11个北京地方枣,所述11个北京地方枣具体为北安河脆枣、红螺脆枣、长辛店白枣、瓶儿枣、鸡心脆枣、缨络枣、郎家园枣、西峰山大家枣、京枣39、莲蓬籽枣和老虎眼枣。
5.一种鉴定或辅助鉴定待测枣品种的方法,包括如下步骤:
1)用权利要求1中所述引物对对待测枣的基因组DNA进行PCR扩增,得到待测枣PCR扩增产物;
2)用权利要求1中所述荧光引物对所述待测枣PCR扩增产物进行荧光标记扩增,得到待测枣带荧光扩增产物;
3)将所述待测枣带荧光扩增产物进行毛细管电泳检测,
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为298.41bp和304.3bp,则所述待测枣为或候选为北安河脆枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为303.28bp和307.49bp,则所述待测枣为或候选为红螺脆枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为298.25bp和302.14bp,则所述待测枣为或候选为长辛店白枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为298.33bp,则所述待测枣为或候选为瓶儿枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为302.15bp和304.31bp,则所述待测枣为或候选为鸡心脆枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为349.34bp,则所述待测枣为或候选为缨络枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为298.32bp,则所述待测枣为或候选为郎家园枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为301.8bp和303.85bp,则所述待测枣为或候选为西峰山大家枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为302.29bp和304.36bp,则所述待测枣为或候选为京枣39;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为304.34bp,则所述待测枣为或候选为莲蓬籽枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小为298.58bp,则所述待测枣为或候选为老虎眼枣;
若所述待测枣带荧光扩增产物的大小不满足上述任一种大小,则所述待测枣不为或候选不为11个北京地方枣品种中任一个,所述11个北京地方枣为北安河脆枣、红螺脆枣、长辛店白枣、瓶儿枣、鸡心脆枣、缨络枣、郎家园枣、西峰山大家枣、京枣39、莲蓬籽枣和老虎眼枣。
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