[发明专利]基于核酸适配体检测链霉素的生物传感器及其制备方法有效
申请号: | 201510135113.7 | 申请日: | 2015-03-26 |
公开(公告)号: | CN104764790B | 公开(公告)日: | 2017-06-09 |
发明(设计)人: | 王玉;崔洁;黄加栋;刘素;徐伟;王虹智;郭玉娜;许颖;邱婷婷 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N27/48 | 分类号: | G01N27/48;G01N27/327;G01N33/543 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人: | 张世静 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 核酸 体检 链霉素 生物 传感器 及其 制备 方法 | ||
1.一种基于核酸适配体检测链霉素的生物传感器,其特征在于,在金电极上依次修饰有MB capture probe层、HAP与ssDNA层;
所述的生物传感器, MB capture probe层的厚度为10±2nm、HAP与ssDNA层的厚度为15±2nm;
其制备包括以下步骤:
(1)对金电极进行预处理;
(2)将MB capture probe层修饰到电极表面;
(3)将HAP 与ssDNA层修饰到电极表面;
步骤(3)的具体操作步骤为:
1)将灭菌水,10×的buffer缓冲液、1μL的浓度为50μM的 ssDNA、1μL的浓度为10μM HAP和待测目标物加入离心管中,震荡30s,放入37℃的恒温箱中孵育2h;
2)向离心管中加入核酸外切酶Exo Ⅲ,震荡30s,放入37℃的恒温箱中孵育2h;
3)将孵育好的混合溶液滴加到修饰好MB capture probe层的电极上,将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h,清洗;
其中,HAP 层中HAP与核酸外切酶Exo Ⅲ的摩尔与活性的比为1:250;
所述的MB capture probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:3 所示;
所述的HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:1 所示;
所述的ssDNA的核苷酸序列如 SEQ ID NO:2 所示。
2. 根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(1)的具体操作步骤为,取金电极在0.3μM和0.05 μM的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水冲洗。
3.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(2)的具体操作步骤为:将10μM的MB capture probe 10μL滴加到经过预处理的金电极表面,在25℃下孵育2h。
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