[发明专利]一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用

权利要求书

1.一种水稻稻瘟病抗性基因Pita的分子标记，其特征在于，所述分子标记由一对外引物Pita-O-F、Pita-O-R和一对内引物Pita-T-F、Pita-C-R组成，引物序列如SEQ ID NO：1～4所示。

2. 权利要求1所述分子标记在鉴定稻瘟病抗性基因Pita基因型或/和水稻能否抗稻瘟病中的应用。

3. 权利要求1所述分子标记在水稻育种中的应用。

4. 利用权利要求1所述分子标记鉴定稻瘟病抗性基因Pita基因型的方法。

5. 利用权利要求1所述分子标记鉴定水稻能否抗稻瘟病或同时鉴定稻瘟病抗性基因Pita基因型和水稻能否抗稻瘟病的方法。

6. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1 待测样品DNA提取；

S2 以S1得到的样品DNA为模板，构建PCR反应体系，利用权利要求1所述分子标记进行PCR扩增；

S3 分析PCR扩增后的产物，进行结果判定，所述结果判定为：若出现202bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为抗病基因型；若出现156bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为感病基因型；若出现156bp、202bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为杂合型。

7. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1 待测样品DNA提取；

S2 以S1得到的样品DNA为模板，构建PCR反应体系，利用权利要求1所述分子标记进行PCR扩增；

S3 分析PCR扩增后的产物，进行结果判定，所述结果判定为：若出现202bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为抗病基因型，待测样品为抗稻瘟病品种；若出现156bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为感病基因型，待测样品为感稻瘟病品种；若出现156bp、202bp和309bp条带，则表明待测样品的Pita为杂合型，待测样品为感稻瘟病菌品种。

8. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述PCR反应体系为：DNA模板1.0 uL、Pita-T-F 0.3 uL、Pita-G-R 0.3 uL、Pita-O-F 0.3 uL、Pita-O-R 0.3 uL、2×Power Taq PCR Master Mix 7.5uL，其余由双蒸灭菌水补足15uL。

9. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述反应条件为：94℃预变性5min，94℃ 30sec，57℃ 30sec，72℃ 35sec共运行33个循环，72℃再延伸10min。