[发明专利]吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，涉及一种免疫亲和搅拌棒及其制备方法，特别是吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒及其制备方法与应用。

背景技术

随着我国经济的发展，人们生活水平的日益提高，对各种动物源性食品的需求量也逐渐增大，食品安全问题自然成为大家关注的焦点。近年来关于兽药残留引起的对人身体健康造成危害的报道屡见不鲜，相关食品安全部门也致力于检测方法的研究。由于生物样品的成分复杂、药物与样品成分之间易互相结合和残留药物浓度低等均给样品中药物的提取净化带来了很大的困难，因此分析方法的选择性和灵敏度直接决定了检测的成功与否。

免疫亲和搅拌棒（Imunoaffinity stir bar）是免疫亲和固相微萃取（Immunoaffinity solid phase microextraction, Immunoaffinity SPME）的一种装置形式，将固相微萃取（Solid phase microextraction, SPME）与免疫亲和色谱（IAC,immunoaffinity chromatography）相结合，既具有SPME易于操作、使用溶剂少和节省时间的优点，又有免疫亲和色谱高度选择性和高亲和性的特点，使SPME在兽药残留分析中，选择性、亲和性和灵敏度方面得到了很大的提升。Immunoaffinity stir bar常被用作样品的萃取，尤其适用于复杂基质中痕量分析物的提取，与多种检测手段结合使用进行分析测定，具有广阔的应用前景。

    氯霉素是由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素，可作用于细菌核糖核蛋白体50S亚基，而阻挠蛋白质的合成，属抑菌性广谱抗生素。氯霉素对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用，且对后者的作用较强。其中对伤寒杆菌、流感杆菌、副流感杆菌和百日咳杆菌的作用比其他抗生素强，对立克次体感染如斑疹伤寒也有效，但对革兰阳性球菌的作用不及青霉素和四环素。敏感菌有肠杆菌科细菌及炭疽杆菌、肺炎球菌、链球菌、李斯特氏菌等。衣原体、钩端螺旋体、立克次体。同类药物主要包括氯霉素（Chloramphenicol, CAP）、和琥珀氯霉素（Chloramphenicol Succinate）等。

氯霉素( Chloramphenicol, CAP) 是第一个全化学人工合成的抗生素, 具有优良的抗菌性和稳定的药性, 曾在一段时间内作为饲料添加剂和细菌性疾病的治疗用药。在畜牧业领域, 氯霉素以其迅速稳定的疗效, 曾广泛用于奶牛乳腺炎的治疗。但由于含有硝基, 氯霉素有严重的副作用, 对造血系统产生与剂量有关的可逆性骨髓抑制( 贫血伴有白细胞和血小板减少) 及与剂量无关的不可逆性再生障碍性贫血。许多国家禁止在食用动物饲养和治疗中使用, 动物性食品中氯霉素含量不得检出; 我国也明令作为兽药禁用, 且所有动物可食组织均不得检出。但是, 由于氯霉素价格相对低廉, 效果明显, 仍有不少动物养殖者及饲料生产企业违规使用, 国内动物性食品中氯霉素残留现象依然十分严重。

    近几十年来，各种食品安全监测机构、各类从事相关工作的研究人员针对食品和饲料中氯霉素的残留分析进行了深入全面的研究。目前用于CAP检测的主要技术有：酶联免疫吸附分析( ELISA）、气相色谱法（GC）、和气相色谱-质谱联用分析法（GC/MS）及高效液相色谱（HPLC）等方法。ELISA 法主要用于半定量快速筛选； GC和GC/MS由于需衍生化, 操作较为麻烦； HPLC 分析较准确且过程相对较简便，但检测限比较高。本由于样品基质成分复杂，在萃取过程中很容易将待测药物与其他性质相似的成分一起提取出来，给检测造成困难。因此，在检测之前“净化”工作是必不可少的，通常采用净化方法主要有液-液萃取（LLE）和固相萃取（SPE）。LLE过程需要使用大量有机溶剂，而一些有机溶剂性质稳定，不易降解，对环境造成污染，而且操作繁琐。SPE操作简单、省时，但特异性不强是其主要的缺点。Immunoaffinity SPME技术首次于2001年被提出，用Immunoaffinity stir bar净化CAP目前还尚未见报道，更无商品化的Immunoaffinity stir bar出售。

发明内容

  本发明的目的是提供一种吸附2种氯霉素类药物的免疫亲和搅拌棒及其制备方法。

为实现上述目的，本发明公开了如下的技术内容：