[发明专利]吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒，其特征在于是由固相载体和与其偶联的氯霉素鼠单克隆抗体组成，其中固相载体与偶联的氯霉素鼠单克隆抗体的偶联长度与重量比为1 cm：2.5 mg；所述的单克隆抗体是将单克隆杂交瘤细胞株CAP-5D2注入小鼠腹腔，纯化小鼠腹水得到；所述的固相载体为10 cm×4 mm玻璃棒，偶联抗体的有效长度为2.5 cm。

2.权利要求1所述吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）固相载体表面的处理：将玻璃棒下半部分浸入到双氧水和浓硫酸混合溶液中1h, 依次用超纯水、无水乙醇和超纯水彻底冲洗；其中双氧水：浓硫酸的体积比为30:70；

（2）硅烷化反应：将玻璃棒下半部分浸入ATPES乙醇溶液中，其中ATPES:超纯水：无水乙醇的体积比为5:5:90，室温下反应24 h；

（3）氨基的固定：超纯水和纯乙醇依次冲洗玻璃棒，放入真空干燥箱中80℃并通入氮气氮吹15h；

（4）玻璃棒的活化：玻璃棒浸入2.5%（w/w）的戊二醛PBS溶液中5 h，之后用超纯水冲洗；

（5）偶联反应：玻璃棒浸入单克隆杂交瘤细胞株CAP-5D2分泌的单克隆抗体PBS溶液，0.5 mg/mL抗体+0.05 mg/mL NaN₃中4℃轻微搅拌24 h；

（6）将玻璃棒上未反应的戊二醛用乙醇胺水溶液（0.3 M）去活化1 h；

（7）稳固共价键：置于PBS+0.05 mg/mL NaN₃+0.2 mg/mL NaCNBH₃混合溶液中4℃反应48h，将酰亚胺还原为胺使共价键结合更加牢固；所述固相载体为高硼硅玻璃棒、高纯硅玻璃棒或石英玻璃棒。

3.权利要求2所述吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于所述的固相载体表面使用双氧水：浓硫酸（30:70，v/v）进行清洁和形成粗糙表面。

4.权利要求2所述吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于所述的单克隆抗体指的是对氯霉素和琥珀氯霉素具有特异反应的单克隆杂交瘤细胞株CAP-5D2分泌的单克隆抗体。

5.权利要求1所述吸附氯霉素的免疫亲和搅拌棒在制备吸附2种氯霉素类药物方面的应用；2种氯霉素类药物指的是：氯霉素和琥珀氯霉素。