[发明专利]一种炎症诱导蛋白组分、其制备方法及产品有效

专利信息
申请号: 201510116159.4 申请日: 2015-03-17
公开(公告)号: CN104740619B 公开(公告)日: 2017-07-11
发明(设计)人: 马兆成;王小丽;邓秀新 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: A61K38/44 分类号: A61K38/44;A61K38/00;A61K36/77;A61P35/00;C07K1/14;C07K1/34
代理公司: 武汉东喻专利代理事务所(普通合伙)42224 代理人: 纪元
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 炎症 诱导 蛋白 组分 制备 方法 产品
【权利要求书】:

1.一种炎症诱导蛋白组分,其特征在于,所述炎症蛋白组分为酚提法提取的荔枝蛋白提取物,经鸟枪法质谱分析蛋白,检测得到的肽段覆盖率在10%以上的蛋白质包括:ADP核糖基化因子1、3-磷酸甘油醛脱氢酶GAPC1、Actin-7、14-3-3样蛋白GF14λ、泛素-40S核糖体蛋白S27a-1、14-3-3样蛋白GF14ω、14-3-3样蛋白GF14υ、钙调蛋白1、以及真核起始因子4A-1;所述炎症诱导蛋白组分中蛋白质的分子量在8KD以上。

2.如权利要求1所述的炎症诱导蛋白组分的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将新鲜荔枝去皮、除核并榨碎制得匀浆,固液分离后保留上清液;

(2)将步骤(1)中制得的上清液浓缩,透析48至96小时得到粗提物,截流量在8KD至14KD之间;

(3)对步骤(2)中制得的粗提物进行冷冻干燥,并采用酚提法提取蛋白质,经丙酮洗涤后氮气吹干,得到所述炎症诱导蛋白组分。

3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述透析时间为72小时,截流量为8KDa。

4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述酚提法提取蛋白质的具体步骤为:

(3-1)称取粗提物冷冻干燥粉末加入预冷的酚提取缓冲液中制得混合液,添加量在5mg/mL至8mg/ml之间;

(3-2)将步骤(3-1)中制得的混合液提纯一次或多次,提纯步骤为:加入等体积预冷的Tris饱和酚溶液,混合均匀后震荡离心取上层酚相;

(3-3)在步骤(3-2)中提取的酚相中加入提前预冷的0.05M至0.15M的乙酸铵的甲醇溶液,添加体积比在1:2至2:1之间,静置使蛋白沉淀,并分离得到蛋白质沉淀;

(3-4)将步骤(3-3)得到的蛋白质沉淀,加入丙酮洗涤2次,氮气吹干,得到所述炎症诱导蛋白组分。

5.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(3-1)所述的酚提取缓冲液为含有700mM蔗糖、100mM氯化钾、500mM三羟甲基氨基甲烷以及63.7mM EDTA的水溶液,其pH=7.5。

6.一种促炎制剂,其特征在于,包括如权利要求1所述的炎症诱导蛋白组分。

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