[发明专利]一种便携式血型系统检测试纸及其检测方法

权利要求书

1.一种便携式血型系统检测试纸，其特征在于，该试纸由以下部件组成，固相载体，固相载体上设置有检测通道，检测通道上加样垫、抗体垫或抗原垫、泳动垫、反应垫、吸水垫依次搭接，抗体垫预包被血型检测剂，反应垫上固定有显色试剂；所述抗原垫与加样垫间还搭接有用于分离血浆和红细胞的分离垫；所述显色试剂为：溴甲酚绿混合试剂、溴甲酚紫混合试剂、考马斯亮蓝试剂；混合试剂的辅助试剂为十二烷基聚乙二醇醚或吐温20，添加柠檬酸及柠檬酸钠试剂，调pH 值至4.2±0.5，配成的蛋白质的显色试剂。

2.根据权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述抗体垫为一个或相连的多个，其预包被的血型抗体为ABO、Rh 血型抗体；采用IgM、IgG、IgM-IgG 混合抗体；所述抗原垫预包被抗原为ABO 血型抗原。

3.根据权利要求2所述的试纸，其特征在于，所述ABO 血型抗体为抗A、抗B ；Rh 血型抗体为抗D、抗C、抗c、抗E、抗e 抗体；所述ABO 抗原为A 型红细胞和B 型红细胞；其预包被方法为物理吸附、竞争性结合、磁珠固定法。

4.根据权利要求3所述的试纸，其特征在于，所述试纸中，加样垫、抗体垫及泳动垫采用棉浆纸、印花纸、吸墨纸，所述分离垫为全血滤膜、硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜；所述反应垫为棉浆垫、玻璃纤维垫；所述吸水垫为滤纸、纤维素纤维、纸巾纸。

5.根据权利要求4所述的试纸，其特征在于，所述试纸由固相载体及载体上的五个独立检测通道构成，所述检测通道的各检测通道的加样垫连通或者不连通，设置抗原垫的两检测通道上，加样垫、分离垫、抗原垫、泳动垫、反应垫、吸水垫依次搭接；两抗原垫上分别包被A 型红细胞和B 型红细胞；设置抗体垫的三个检测通道上，加样垫、抗原垫、泳动垫、反应垫、吸水垫依次搭接；三个抗体垫上分别包被抗A 抗体、抗B 抗体及Rh 血型的抗D 抗体。

6.根据权利要求1-5任一所述的试纸，其特征在于，所述检测通道采用蜡染、蜡浸、微流控或芯片法制备。

7.根据权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述固相载体为有机玻璃、聚乙烯、ABS 塑料、聚氯乙烯材料或聚对苯二甲酸乙二醇酯。

8.根据权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述试纸有外壳或无外壳，外壳为有机玻璃、聚苯乙烯、聚碳酸酯类透明或不透明的塑料；其外观为圆形、椭圆形、正方形或长方形；外壳按需设有加样区，观察区，信息粘贴区，握持区；加样区、观察区形状为方形、圆形。

9.一种利用权利要求1-8任一项所述试纸检测血型的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将待检测血样由加样垫加入，血样中的RBC 表面抗原与抗体垫预包被的抗体结合反应，经过抗体垫选择性结合后剩余的血样物质继续运动经泳动垫分离，并滴加冲洗液使未凝集的血样物质与反应垫的显色试剂反应显色，依据不同颜色判断相应血型及血样是否有效层析至反应垫；血液中带有的抗体的血浆经加样垫及分离垫与血液中的RBC 分离，与抗原垫预包被的RBC 反应凝集，未凝集的血样物质经冲洗液冲洗后与反应垫的显色剂反应显色，依据不同颜色判断相应血型及血样是否有效层析至反应垫；吸水垫在检测通道末端吸取多余液体，提高液体由前向后运动速度，缩短检测时间。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，该方法包括正定型检测及反定型检测，正定型检测为在每一通道的抗体垫上预包被血型抗体，从加样孔滴加血液样本后，血液样本中的RBC 表面抗原与抗体垫中预包被的抗体结合反应；反定型检测为在抗原垫上包被红细胞，从加样孔滴加全血后，通过分离垫自动分离血浆和RBC，使血浆与通道中预包被的RBC 发生反应，若RBC 凝集；待滴加冲洗液后，已经凝集的RBC 无法移动，而血液中未凝集的血浆通过层析作用与反应垫的显色试剂反应形成蓝绿色复合物；若RBC 未发生凝集，则未凝集的RBC 和血浆通过层析与反应垫的显色试剂反应，形成灰褐色复合物，从而快速进行正反定型血型鉴定。

11.根据权利要求9或10所述的方法，其特征在于，所述冲洗液为：柠檬酸- 柠檬酸钠冲洗液、柠檬酸- 氢氧化钠- 盐酸缓冲液、邻苯二甲酸- 盐酸缓冲液、磷酸氢二钠- 柠檬酸缓冲液、乙酸- 乙酸钠缓冲液、邻苯二甲酸氢钾- 氢氧化钠缓冲液、甘氨酸- 盐酸缓冲液、苯二甲酸氢盐中的任一种，冲洗液pH 值为4.2±0.5，用量为5-100μl。