[发明专利]一种提高阿维菌素发酵水平的补料方法

说明书

本发明涉及一种提高阿维菌素发酵水平的补料方法，采用淀粉浓度为6～10％，硫铵浓度为0.01～0.05％，酵母浓度为0.1～0.5％，淀粉酶浓度为0.002～0.01％的混合物为补料，在发酵的中后期进行补料，该补料方法确保了料罐碳源、氮源的合适浓度，以及补料的合适时机，使得阿维菌素生产水平有提高3‑5％，有效提高了发酵生产水平，而且不对产品本身及下游产品的内在质量造成影响，具有明显的经济效益和推广价值。

技术领域：

本发明涉及一种生物农药的制备方法，具体涉及一种提高阿维菌素发酵水平的补料方法。

背景技术：

阿维菌素，英文名称Avermectins，是由日本北里大学大村智和美国Merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，具有结构新颖、农畜两用的特点，由链霉菌中灰色链霉菌Streptomyces avermitilis发酵产生。阿维菌素是一种常见的农药制剂，广泛应用于农业，作为杀虫剂，用于防治十字花科小菜蛾、梨树梨木虱、棉花红蜘蛛、柑橘潜叶蛾锈壁虱、棉花棉铃虫、苹果树桃小食心虫和二斑叶螨、菜青虫等。阿维菌素的发酵是一个产热的过程，伴随着温度升高的同时，发酵液中的水分也在不断地蒸发，同时由于空气温度的影响，也存在水分的蒸发。因此一方面会引起发酵液的粘度上升，使得溶氧降低，不利于菌体的生长代谢和酶的催化作用，使得效价增长受阻，另一方面水分的蒸发，导致最终放罐的体积缩小，单罐总亿降低，影响产量，同时会使得发酵液浓缩，单位体积内糖的含量增加，不利于菌体的代谢。

目前，阿维菌素采取的是分批式发酵，所需营养物质一次性加入培养基中，直至本批发酵结束，发酵过程略有补糖。但采取中后期补糖后，过浓会导致糖阻，菌丝返青等现象，影响效价生长；过稀会导致培养基基质浓度降低，氮源不足。目前，虽然已有阿维菌素发酵补料工艺的研究，在阿维菌素发酵中后期通过流加或批补葡萄糖液来增加产量，但是效果并不明显，仅能增加部分放罐体积，而培养基利用不彻底、单位干物质发酵产率下降、发酵设备利用率低等问题仍未得到彻底解决。

因此，解决阿维菌素发酵中后期补料工艺有待提高。

发明内容：

针对现有生产阿维菌素发酵过程补料出现的问题，本发明提供一种提高阿维菌素发酵水平的补料方法，该补料方法选用特定补料，以及在合适时机进行补料，提高了发酵效价，使得阿维菌素生产水平有提高3-5％。

本发明的技术方案如下：

一种提高阿维菌素发酵水平的补料方法，所需要的阿维菌素发酵补料由淀粉、硫铵、酵母粉、淀粉酶和水组成；按各组分质量比之和百分之百计，其中，淀粉为6～10％，硫铵为0.01～0.05％，酵母为0.1～0.5％，淀粉酶为0.002～0.01％，其余为水；

补料方法按如下步骤进行：

(1)将阿维菌素发酵补料输送至补料罐中，升温至70～80℃进行液化45～50min，使部料罐内还原糖为1.5～1.7g/100ml，然后升温至110～130℃进行灭菌20～30min，最后降温至70～80℃，得灭菌后的液化补料，备用；

(2)发酵罐发酵周期进行到160～180h，发酵罐内总糖低于5.5～6.0g/100ml时，补加灭菌后的液化补料；发酵罐发酵周期进行到190～210h，发酵罐内总糖低于4.5～5.0g/100ml时，补加灭菌后的液化补料；发酵罐发酵周期进行到220～240h，发酵罐内总糖低于4.0～4.5g/100ml时，补加灭菌后的液化补料；每次补料按发酵罐内料液质量的1～3％补加。

本发明优选的，按各组分质量比之和百分之百计，淀粉为8-10％，硫铵为0.02-0.03％，酵母粉为0.2-0.3％，淀粉酶为0.008-0.01％。

进一步优选的，按各组分质量比之和百分之百计，淀粉为10％，硫铵为0.02％，酵母粉为0.2％，淀粉酶为0.01％。

本发明优选的，所述的淀粉酶α-淀粉酶。