[发明专利]利用冬笋壳制备木糖醇的方法有效
| 申请号: | 201510103334.6 | 申请日: | 2015-03-09 |
| 公开(公告)号: | CN104762333B | 公开(公告)日: | 2018-05-22 |
| 发明(设计)人: | 杨胜利;张慧;羊悦;祝燕燕 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
| 主分类号: | C12P7/18 | 分类号: | C12P7/18;C12R1/74 |
| 代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;王兵 |
| 地址: | 310014 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 利用 冬笋 制备 木糖醇 方法 | ||
1.一种利用冬笋壳制备木糖醇的方法,其特征在于,所述方法按如下步骤进行:
(1)水解:将原料冬笋壳洗净,烘干后破碎,置于水解釜中,加入原料冬笋壳质量3~4倍的水,煮沸90~120min,排水后再加入原料冬笋壳质量5~6倍的0.5wt%~1wt%硫酸水溶液,在120~130℃,0.1~0.15MPa的条件下水解3~5h,得到水解液;
(2)中和:将步骤(1)所得水解液升温至75~80℃,边搅拌边加入CaCO
(3)脱色:将步骤(2)所得糖液减压浓缩至所述糖液体积的1/5~1/7倍,滤除析出的固体,升温至75~80℃,pH调为2.5~3.5,边搅拌边加入活性炭进行脱色,脱色后滤除活性炭,得到脱色后的糖液;
(4)离子交换:对步骤(3)所得脱色后的糖液进行离子交换,采用732型强酸性阳离子树脂和D201型强碱多孔阴离子树脂进行交叉处理,所述交叉处理的方法为:先用所述阳离子树脂对脱色后的糖液进行离子交换,再用所述阴离子树脂进行离子交换,以此为一个周期,重复进行1~3次,得到离子交换后的糖液;
(5)发酵:首先配制培养基:将步骤(4)所得离子交换后的糖液、酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨、水混合即得到培养基,接入以热带假丝酵母Candida tripicalis,保藏号:AS2.1776为出发菌株制得的酶源,在200~220r/min,28~32℃的条件下发酵48~52h,得到发酵液,然后将所得发酵液在8000~10000rpm下离心20~25分钟,取上清液,纯化得抽提液冷却后析出晶体,过滤收集晶体并干燥,得到产物木糖醇;所述培养基中,所述糖液中的木糖的终浓度为120~150g/L,所述酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨的终浓度分别为8~12g/L,溶剂为水,初始pH为5.0~6.0。
2.如权利要求1所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(1)中,将所述冬笋壳烘干后破碎至粒度为3~5mm。
3.如权利要求1所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述CaCO
4.如权利要求1所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述活性炭的质量用量为所述糖液质量的8%~12%。
5.如权利要求1所述的制备木糖醇的方法,其特征在于所述的步骤(5)纯化方法为:所述上清液,加入活性炭,调节pH至4.8~5.2,煮沸,冷却至室温,抽滤,取滤液在50~55℃下减压蒸干得到固体物质,并在50~55℃下用无水乙醇抽提得抽提液;所述活性炭的质量用量以所述上清液的体积计为18~25g/L。
6.如权利要求1所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述的酶源为所述的热带假丝酵母种子液,所述热带假丝酵母种子液的接种体积量是所述培养基体积的5%~15%,所述的热带假丝酵母种子液按如下方法制得:
(1)斜面培养:将热带假丝酵母菌Candida tripicalis,保藏号:AS2.1776接种至斜面培养基,30℃培养3~4天,获得斜面菌体,所述斜面培养基终浓度组成为:酵母膏1.5~5g/L,蛋白胨2~5g/L,琼脂粉18~25g/L,木糖30~50g/L,pH 5~6,溶剂为水;
(2)种子培养:从斜面菌体挑选一环菌体接种至种子培养基中,30℃、200rpm培养24h,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖5~15g/L,D-木糖5~15g/L,酵母膏1.5~5g/L,蛋白胨2~5g/L,麦芽汁2~5g/L,pH 5~6,溶剂为水。
7.如权利要求6所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,所述的热带假丝酵母种子液按如下方法制得:
(1)斜面培养:将热带假丝酵母菌AS2.1776接种至斜面培养基,30℃培养3~4天,获得斜面菌体,所述斜面培养基终浓度组成为:酵母膏2g/L,蛋白胨3g/L,琼脂粉20g/L,木糖40g/L,溶剂为水,pH 5.5;
(2)种子培养:从斜面菌体挑选一环菌体接种至种子培养基中,30℃、200rpm培养24h,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖10g/L,D-木糖10g/L,酵母膏2.0g/L,蛋白胨3.0g/L,麦芽汁3.0g/L,pH 5.5,溶剂为水。
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