[发明专利]解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH‑3及其应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌株，其特征在于：该菌株的分类命名为解淀粉芽孢杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefacienssubsp.plantarum)，其保藏编号为：CGMCC No.9884。

2.如权利要求1中所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌株的菌原粉的制备方法，包括如下步骤：

(1)、活化菌种

活化解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌株，待解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3在LB固体培养基上的菌落为乳白色，圆形，明显突起，表面光滑，不透明，边缘整齐；

(2)、一级种子液的制备

选取LB固体培养基上的单菌落，接种于一级种子摇瓶中，将一级种子摇瓶在32℃、180r/min下培养14小时，得到一级种子液；

(3)、二级种子液的制备

种子罐中的培养基仍为LB液体培养基，121℃下，灭菌20min，将一级种子液接入种子罐中培养，培养结束时得到二级种子液；

(4)、解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌液发酵

将步骤(3)所得解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3的二级种子液，按照接种量为1％接入发酵罐中，在发酵培养基下培养，得到发酵成熟菌剂；

(5)、解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌原粉

步骤(4)所得的发酵成熟菌剂经碟片离心机或微滤设备浓缩后，加入轻质碳酸钙，浓缩成熟发酵菌剂与轻质碳酸钙的重量比为100:3，得到液固混合物，将该液固混合物搅拌30min后，利用输料泵将液固混合物送入离心式喷雾塔中干燥，得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉。

3.如权利要求2所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌株的菌原粉的制备方法，其特征在于：

所述步骤(1)中所述LB固体培养基配方：每升培养基中，蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，溶剂为水，pH7.0-7.2，固体培养基在液体培养基中加2％琼脂；

所述步骤(3)中所述种子罐的接种量为0.5-1％(V/V)；培养条件为：通气比1：1，搅拌转速为250-400r/min，培养温度32℃，罐压0.05Mpa，培养12小时；所述二级种子液的活菌含量为1-3×10⁸cfu/mL，OD值0.85；

所述步骤(4)中所述发酵培养基的配方(重量百分比)：玉米淀粉3％，豆粕粉3％，酵母膏0.9％，氯化钠0.25％，碳酸钙0.25％，硫酸镁0.4％，磷酸氢二钾0.3％，pH7.2-7.5，121℃灭菌30min；培养条件为：通气比为1：0.7，搅拌转速为180r/min、罐压0.05MPa、培养温度32℃、培养时间为48h，发酵过程中根据泡沫情况流加消泡剂；下罐时间以取样镜检芽孢90％以上释放为准，成熟发酵液中解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢含量为30～40×10⁸cfu/mL；

所述步骤(5)中所述离心式喷雾塔的干燥条件为：进风口温度为180-200℃，出风口温度为80-85℃，菌原粉中含水量小于5％(W/W)，活芽孢含量2000×10⁸cfu/g。

4.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌株在防治水果采后病害中的应用，所述病害为柑桔绿霉病、柑桔青霉病、柑桔酸腐病、柑桔炭疽病、柑桔蒂腐病、香蕉炭疽病、香蕉轴腐病、草莓灰霉病或草莓软腐病。