[发明专利]用于检测GPIb-凝血酶相互作用的调节因子的方法和用于进行该方法的测定试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测样品中GPIb–凝血酶相互作用的调节因子的方法，使所述样品与分离的GPIbα蛋白并且与分离的凝血酶接触并且测定所述GPIbα蛋白与凝血酶之间的复合物的形成，其特征在于，所述GPIbα蛋白是突变的，并且与SEQ ID NO:1中列出的人类GPIbα蛋白的野生型序列相比，包含至少氨基酸残基1–268并且具有来自由G233V、G233S、D235Y、D235V、K237V、M239V和M239S组成的组的至少一个替换。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述样品没有与瑞斯托霉素或者波特洛蛇毒素接触。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述凝血酶和/或所述GPIbα蛋白与固相相关联。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述凝血酶和/或所述GPIbα蛋白经由结合伴侣与所述固相相关联。

5.根据权利要求3所述的方法，其中，所述凝血酶和/或所述GPIbα蛋白经由抗体与所述固相相关联。

6.根据权利要求3所述的方法，其中，所述固相是微粒状固相。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，基于所述微粒状固相的凝集确定凝血酶与GPIbα蛋白之间复合物的形成。

8.根据权利要求3所述的方法，其中，所述固相是非颗粒状固相。

9.根据权利要求3所述的方法，其中，所述固相是微量滴定板的表面。

10.一种用于进行权利要求1所述的方法的测定试剂盒，包含含有分离的GPIbα蛋白的第一试剂，所述GPIbα蛋白是突变的，并且与SEQ ID NO:1中列出的人类GPIbα蛋白的野生型序列相比，包含至少氨基酸残基1–268并且具有来自由G233V、G233S、D235Y、D235V、K237V、M239V和M239S组成的组的至少一个替换；和包含凝血酶的第二试剂。

11.根据权利要求10所述的测定试剂盒，其中，所述第二试剂包含与所述凝血酶关联的固相。

12.根据权利要求10和11中任一项所述的测定试剂盒，进一步包含用于检测所述分离的GPIbα蛋白的一种或多种试剂。

13.根据权利要求12所述的测定试剂盒，其中，用于检测所述分离的GPIbα蛋白的所述一种或多种试剂包含对于所述分离的GPIbα蛋白特异的酶标记的抗体和用于所述酶的底物。

14.根据权利要求10所述的测定试剂盒，其中，所述第一试剂包含与所述分离的GPIbα蛋白相关联的固相。

15.权利要求10和14中任一项所述的测定试剂盒，进一步包含用于检测凝血酶的一种或多种试剂。

16.根据权利要求15所述的测定试剂盒，其中，用于检测凝血酶的所述一种或多种试剂包含对凝血酶特异的酶标记的抗体和用于所述酶的底物或者具有凝血酶-可切割信号基团的肽底物。