[发明专利]一种同时检测咖啡中多种糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同时检测咖啡中多种糖的方法，属于离子色谱检测领域。

背景技术

鉴于咖啡制品的饮用对象的不同以及咖啡制品的质量监督，咖啡制品中糖的含量需要进行严格的检测。目前咖啡制品中糖的测定方法主要为采用安培检测器的离子色谱法和采用光检测器的高效液相色谱法，电化学检测器对各种小分子寡糖均具有响应，糖类分子在紫外检测器等条件下的吸收波长相同，两大类检测器均不具有特异性，而小分子寡糖之间的相互分离存在很大的困难。目前AOAC标准中咖啡制品中糖的分析就存在木糖与甘露糖之间相互干扰的问题。本研究方法利用离子色谱对糖进行初步分离，然后利用质谱检测器对糖进行检测，利用质谱自身具有的分离能力对未分离开的糖分别检测，可以充分解决含碳量不同的糖之间的相互干扰，方法准确性高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种同时检测咖啡中多种糖的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

本发明提供的同时检测咖啡中多种糖的方法，包括下列步骤：

（1）样品前处理

取咖啡样品，固体样品在粉碎机上进行粉碎，液体样品直接取样。取粉碎后的固体样品或未处理的液体样品0.5g，加入49.5g去离子水，30摄氏度条件下震荡摇匀30min，5000r/min离心5min，取上层清夜过0.22um的微孔滤膜过滤，过滤后的溶液稀释10倍进样分析。

 （2）进样分析

使用离子色谱仪对样品进行分离，流动相为5mM NaOH溶液，色谱柱为Dionex CarboPac^TM PA20色谱柱（3*150mm，Thermo），配有Dionex CarboPac^TM PA20保护柱（3*30mm，Thermo）。

（3）定性定量分析

    将各种糖的标准溶液按照上述步骤进样分析，得到各自的保留时间，通过与样品中的出峰时间对比，进行定性分析。

所述的流动相流速为0.38mL/min，AERS 4mm抑制器，抑制器需要回流水，回流水流速为0.40mL/min；抑制器电流为6mA，使用AB Sciex的4000 Q-Trap LC/MS/MS System进行检测，离子化温度为550摄氏度，离子化电压为4500eV，离子源Gas1为20psi，离子源Gas2为50psi。

所述的流动相的制备方法是：400.0g NaOH固体（色谱纯）加300.0g去离子水溶解，静止，待温度降至室温后，得到室温下NaOH过饱和溶液，浓度为19.1mol/L；使用时取5.25mL NaOH过饱和溶液稀释至100mL得到1.0mol/L NaOH溶液，取5.0mL 1.0mol/L NaOH溶液稀释至1000mL得到5.0mM NaOH溶液，5.0mM NaOH溶液作为流动相使用。

本发明的方法可以同时检测咖啡中的糖是葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、蔗糖。

对葡萄糖标准溶液进行分析，检测分子量为203.200Da，Dp电压60.000eV，保留时间为11.28min；对果糖标准溶液进行分析，检测分子量为203.200Da，Dp电压60.000eV，保留时间为15.58min；对甘露糖标准溶液进行分析，检测分子量为203.200Da，Dp电压60.000eV，保留时间为14.03min；对木糖标准溶液进行分析，检测分子量为173.200Da，Dp电压70.000eV，保留时间为13.24min；对阿拉伯糖标准溶液进行分析，检测分子量为173.200Da，Dp电压70.000eV，保留时间为8.08min；对蔗糖标准溶液进行分析，检测分子量为365.200Da，Dp电压110.000eV，保留时间为11.08min。

本发明的有益效果：

本发明的方法可以同时检测咖啡中多种糖，操作简单，结果准确可靠。本方法可以充分避免五碳糖与六碳糖、十二碳糖之间的干扰，彻底解决了含碳不同的糖组分之间的假阳性问题。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。

图1是对葡萄糖标准溶液进行分析的色谱图。

图2是对果糖标准溶液进行分析的色谱图。

图3是对甘露糖标准溶液进行分析的色谱图。

图4是对木糖标准溶液进行分析的色谱图。

图5是对阿拉伯糖标准溶液进行分析的色谱图。

图6是对蔗糖标准溶液进行分析的色谱图。