[发明专利]生物改性半夏蛋白的制备方法及其在制备抗肺癌药品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物的制备方法及其新用途，具体涉及生物改性半夏蛋白的制备方法及其在制备抗肺癌药品中的应用。

背景技术

原发性支气管肺癌是最常见的肺部原发性恶性肿瘤，绝大多数起源于支气管黏膜上皮，也有源于纤体或肺泡上皮者。

肺癌的分子发病机制一班认为肺癌由遗传和环境及饮食等诸多因素相互作用所致，其发病是一个多步骤的过程，涉及基因亚稳态集群运动的状态和表达调控。

现在用于肺癌治疗的方法有手术治疗、放射治疗、化学治疗、生物治疗、中医治疗和中西医结合治疗。

201110053934.8公开了一种蟾肽抗生素制成的用于治疗肺癌的药品，该发明采用蟾蜍蛆虫为原料，用溶剂萃取、加温变性除蛋白、色谱柱分离、超声波液相制备色谱纯化并用真空冷冻干燥制取的蟾肽抗生素为原料，再用适宜赋形剂相结合制备成各种剂型的药品。

CN103310105A公开了筛选非小细胞肺癌治疗疗效生物标记物的方法，该发明采用五个步骤对疗效生物标记物筛选，用于非小细胞肺癌治疗前的指导。

CN103720689A公开了一种TGF-β1抑制剂在肺癌治疗中的用途，该发明利用TGF-β1抑制GF-β1通道增加肺癌细胞的放射敏感性。

CN103536925A公开了强心苷化合物在非小细胞肺癌治疗中的应用，该发明涉及强心苷化合物在制备用于治疗非小细胞肺癌的药物中的用途。

CN102575300A公开了肺癌治疗和诊断的靶基因CSTF2，该发明涉及CSTF2基因在癌症发生中的作用，通过施用针对CSTF2基因的双链分子或含有此类双链分子的组合物、载体或细胞来治疗或预防癌症。

CN103459422A公开了靶向HGF的多特异性抗原结合蛋白，该发明涉及HGF拮抗剂和VEGF拮抗剂的组合，并且提供了结合HGF的抗原结合蛋白。

CN1846784公开了蛞蝓PE₄糖蛋白及其生产工艺，该发明涉及从蛞蝓体中提取蛞蝓PE₄糖蛋白并制备成胶囊剂、颗粒剂、片剂、水针剂、冻干粉剂。

CN101878023A公开了靶向肺癌的肽及其应用，该发明提供了核酸、肽和抗体用于诊断和治疗，并用肽与抗癌药物长春瑞滨或多柔比星的脂质体偶合，改进了这些药物的效力。

中药半夏为天南星科多年生草本植物，半夏的块根辛、温，有毒，入脾、胃经，具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功效。由于半夏的毒性限制了其用途，千百年来人们研究了各种炮制半夏的工艺。

201210315547.1公开了中药半夏蛋白生物改性工艺，该发明以中药半夏等多种原料，采用特殊工艺过程生成昆虫体，将植物蛋白改性成动物重组基因蛋白，通过生物改性工艺既降低了半夏蛋白的毒性，又赋予较好的生物活性功能。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物改性半夏蛋白的制备方法及其在制备抗肺癌药品中的应用，本发明工艺过程中采用适宜的方法提取分离纯化生物改性半夏蛋白，并根据生物改性半夏蛋白的理化特性、生物特性辅以相应的材料制备成不同剂型的药品。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

（1）将1000g生物改性半夏虫体在常温膨化装置（200520108339.X）中常温条件下膨化粉碎。

本步骤中，所述膨化压力为0.1~5MPa，时间为10~60min。

（2）膨化粉碎后的物料加入到膨胀溶剂体系提取装置（201210179076.6）中，加入膨胀溶剂并加压至2~10MPa，形成膨胀溶剂体系，提取出生物改性半夏蛋白粗品。

本步骤中，所述膨胀溶剂由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL甲醇及100~300gNH₃·H₂O组成或由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL乙醇及100~300g氯化铵组成。

本步骤中，所述提取温度为10~20℃，时间为10~30min。

（3）收集含有生物改性半夏蛋白粗品的溶液并且用微孔过滤器过滤去掉杂质。

本步骤中，所述微孔过滤器的孔径为0.5~50μm。

（4）用超滤机超滤处理，收集含有相应分子量的生物改性半夏蛋白超滤溶液。

本步骤中，所述超滤机的孔径为50~100nm。

（5）超滤液溶解在适宜的溶剂中用固相萃取柱分离，收集洗脱成分。

本步骤中，所述溶剂为乙腈。

（6）将洗脱成分溶解在合适的溶剂体系中，用超声驻波液相制备色谱（200920274485.8）分离纯化。