[发明专利]一种提高木质纤维素降解及纤维素酶、半纤维素酶生产的方法有效
申请号: | 201510081685.1 | 申请日: | 2015-02-15 |
公开(公告)号: | CN104845954B | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
发明(设计)人: | 田朝光;林良才;李金根;齐西珍;孙文良;李慧燕;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N1/14;C12N1/15;C12N15/87;C12P19/14;C12R1/66;C12R1/885;C12R1/80;C12R1/77;C12R1/645 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 崔佳佳;马莉华 |
地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 木质 纤维素 降解 纤维素酶 生产 方法 | ||
1.一种提高丝状真菌纤维素酶和/或半纤维酶的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解活性的方法,包括步骤:
抑制丝状真菌的纤维素降解相关锌指转录因子或其基因的表达和/或活性,从而提高丝状真菌纤维素和/或半纤维酶的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解活性,其中,所述纤维素降解相关锌指转录因子为至少一种序列,其中所述的至少一种的序列如SEQ IDNO.: 3所示;
所述的丝状真菌为脉孢 菌。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述纤维素降解相关锌指转录因子还有:SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抑制包括敲除和/或下调所述的纤维素降解相关锌指转录因子的表达和/或活性。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子至少包括SEQ ID NO.: 1所示的序列。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的丝状真菌为粗糙脉孢菌。
6.一种纤维素降解相关锌指转录因子或其基因的抑制剂的用途,其特征在于,(a)用于提高丝状真菌纤维素和/或半纤维酶的表达;和/或(b)用于提高丝状真菌的纤维素降解活性;其中,所述纤维素降解相关锌指转录因子为至少一种序列,其中所述一种序列如SEQ IDNO.: 3所示;
所述的丝状真菌为脉孢 菌。
7.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子还有SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。
8.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子的NCBI参考序列号包括: XP_003665650.1、XP_003662015.1、XP_003658871.1、XP_003662960.1。
9.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的抑制剂包括所述纤维素降解相关锌指转录因子的抗体、抑制性mRNA、反义RNA、microRNA(miRNA)、siRNA、shRNA 以及锌指转录因子的活性抑制剂。
10.一种用于降解纤维素的工程菌,其特征在于,所述工程菌中纤维素降解相关锌指转录因子被敲除或被下调,其中所述纤维素降解相关锌指转录因子的序列如SEQ ID NO.: 3所示;且所述的工程菌为脉孢菌。
11.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的脉孢菌包括粗糙脉孢菌。
12.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的工程菌不表达纤维素降解相关锌指转录因子。
13.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,与野生型菌株相比,所述工程菌纤维素酶和/或半纤维素酶的表达量和/或活性至少提高了20%。
14.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子还有选自SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。
15.一种生产纤维素酶和/或半纤维素酶的方法,其特征在于,在纤维素原料的存在下,培养权利要求10所述的工程菌,并从培养物中分离提纯所述的纤维素酶和/或半纤维素酶。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,所述的纤维素原料包括木质纤维素、木聚糖、木质纤维素水解物、木寡糖。
17.如权利要求16所述的方法,其特征在于,所述木质纤维素包括结晶纤维素。
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