[发明专利]一种提高木质纤维素降解及纤维素酶、半纤维素酶生产的方法有效

专利信息
申请号: 201510081685.1 申请日: 2015-02-15
公开(公告)号: CN104845954B 公开(公告)日: 2018-12-14
发明(设计)人: 田朝光;林良才;李金根;齐西珍;孙文良;李慧燕;马延和 申请(专利权)人: 中国科学院天津工业生物技术研究所
主分类号: C12N9/42 分类号: C12N9/42;C12N1/14;C12N1/15;C12N15/87;C12P19/14;C12R1/66;C12R1/885;C12R1/80;C12R1/77;C12R1/645
代理公司: 上海一平知识产权代理有限公司 31266 代理人: 崔佳佳;马莉华
地址: 300308 天津*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 木质 纤维素 降解 纤维素酶 生产 方法
【权利要求书】:

1.一种提高丝状真菌纤维素酶和/或半纤维酶的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解活性的方法,包括步骤:

抑制丝状真菌的纤维素降解相关锌指转录因子或其基因的表达和/或活性,从而提高丝状真菌纤维素和/或半纤维酶的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解活性,其中,所述纤维素降解相关锌指转录因子为至少一种序列,其中所述的至少一种的序列如SEQ IDNO.: 3所示;

所述的丝状真菌为脉孢 菌。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述纤维素降解相关锌指转录因子还有:SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抑制包括敲除和/或下调所述的纤维素降解相关锌指转录因子的表达和/或活性。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子至少包括SEQ ID NO.: 1所示的序列。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的丝状真菌为粗糙脉孢菌。

6.一种纤维素降解相关锌指转录因子或其基因的抑制剂的用途,其特征在于,(a)用于提高丝状真菌纤维素和/或半纤维酶的表达;和/或(b)用于提高丝状真菌的纤维素降解活性;其中,所述纤维素降解相关锌指转录因子为至少一种序列,其中所述一种序列如SEQ IDNO.: 3所示;

所述的丝状真菌为脉孢 菌。

7.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子还有SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。

8.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子的NCBI参考序列号包括: XP_003665650.1、XP_003662015.1、XP_003658871.1、XP_003662960.1。

9.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的抑制剂包括所述纤维素降解相关锌指转录因子的抗体、抑制性mRNA、反义RNA、microRNA(miRNA)、siRNA、shRNA 以及锌指转录因子的活性抑制剂。

10.一种用于降解纤维素的工程菌,其特征在于,所述工程菌中纤维素降解相关锌指转录因子被敲除或被下调,其中所述纤维素降解相关锌指转录因子的序列如SEQ ID NO.: 3所示;且所述的工程菌为脉孢菌。

11.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的脉孢菌包括粗糙脉孢菌。

12.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的工程菌不表达纤维素降解相关锌指转录因子。

13.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,与野生型菌株相比,所述工程菌纤维素酶和/或半纤维素酶的表达量和/或活性至少提高了20%。

14.如权利要求10所述的工程菌,其特征在于,所述的纤维素降解相关锌指转录因子还有选自SEQ ID NO.: 1、5或7所示序列的一种或多种。

15.一种生产纤维素酶和/或半纤维素酶的方法,其特征在于,在纤维素原料的存在下,培养权利要求10所述的工程菌,并从培养物中分离提纯所述的纤维素酶和/或半纤维素酶。

16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,所述的纤维素原料包括木质纤维素、木聚糖、木质纤维素水解物、木寡糖。

17.如权利要求16所述的方法,其特征在于,所述木质纤维素包括结晶纤维素。

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