[发明专利]对血液中抑制剂具有增加的抗性的热稳定性A型DNA聚合酶突变体

权利要求书

1.一种分离的突变体热稳定性A型DNA聚合酶，其由SEQ ID NO:11组成。

2.一种组合物，其包含(i)权利要求1的突变体聚合酶和(ii)一种或多种选自下组的试剂：含水缓冲液、二价金属、延伸核苷酸、引物、去污剂、检测剂、和靶核酸。

3.一种扩增靶核酸的方法，该方法包括：

提供疑似含有靶核酸的试验样品；

使所述试验样品与权利要求1的突变体聚合酶、与所述靶核酸特异性结合的引物、以及延伸核苷酸接触而形成混合物，并且

在允许所述聚合酶利用所述靶核酸的序列作为用于掺入所述延伸核苷酸的模板来延伸所述引物的条件下温育该混合物。

4.权利要求3的方法，其中所述方法具有以下一个或多个特征：(i)所述方法为PCR的方法，(ii)所述试验样品为血液样品，并且(iii)所述混合物含有至少1％v/v的该血液样品。

5.一种分离的核酸、载体、或宿主细胞，其包含编码权利要求1的突变体聚合酶的核苷酸序列。

6.权利要求5的核酸、载体或宿主细胞，其中所述核苷酸序列为SEQ ID NO:12。

7.一种产生多肽的方法，所述方法包括在培养基中在允许由所述核酸编码的多肽表达的条件下培养权利要求6的宿主细胞，并从经培养的细胞或所述培养基纯化所述多肽。

8.一种用于扩增靶核酸的试剂盒，所述试剂盒包含(i)权利要求1的突变体聚合酶和(ii)一种或多种选自下组的试剂：含水缓冲液、二价金属、延伸核苷酸、引物、探针、去污剂、检测剂、染料、荧光分子、抗凝剂、和细胞裂解剂。