[发明专利]一种转移因子的制备方法及其注射剂的制备方法

权利要求书

1.一种转移因子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，

(1)预处理：将动物脾脏剥离其附着脂肪，用水洗净；

(2)匀浆：加入动物脾脏重量1.5～2倍的注射用水混合后，置于胶体磨内反复绞磨4～6次，制成匀浆，移入-16℃下存放3天以上；

(3)反复冻融：将匀浆反复冻融3～5次；

(4)离心：将匀浆化冻后离心，取匀浆上清液；

(5)乙醇沉淀：在不断搅拌下将匀浆上清液按1∶2的体积比加入无水乙醇，在0～5℃静置12小时以上，离心取上清液减压真空浓缩至原体积的1/5～1/10，回收乙醇；

(6)一次超滤：调节浓缩液pH值至6.0～7.0，分别经50K分子量和10k超滤膜超滤后得转移因子一次溶液；

(7)病毒灭活：在转移因子一次溶液中加入白蛋白至每毫升溶液中白蛋白质量分数为1～2‰，经60℃保温10小时后，迅速将温度降至20℃以下；

(8)二次超滤：经3K～5K分子量的超滤膜超滤后得转移因子溶液。

2.如权利要求1所述转移因子的制备方法，其特征在于，所述反复冻融步骤中将已凝固的匀浆取出置于33～37℃水浴，不断搅拌使其快速融化，待匀浆全部融为液态时，再放入低温-16℃下冷冻，如此反复3～5次。

3.如权利要求1所述转移因子的制备方法，其特征在于，所述离心步骤中，将匀浆化冻后在4℃、转速3000r/min下离心30分钟，取匀浆上清液。

4.如权利要求1所述转移因子的制备方法，其特征在于，所述乙醇沉淀步骤中无水乙醇与匀浆混合物在4℃、转速3000r/min下离心30分钟。

5.如权利要求1所述转移因子的制备方法，其特征在于，所述乙醇沉淀步骤中减压真空浓缩的真空度为-0.03～-0.08MPa。

6.如权利要求1所述转移因子的制备方法，其特征在于，所述动物脾脏为猪脾或牛脾。

7.一种制备权利要求1-6任一所述的转移因子溶液的注射剂的制备方法，其特征在于，还包括步骤(9)测定转移因子溶液内多肽和核酸的含量，加入注射用水调节至每2ml溶液中含多肽3mg和核糖100μg，加入氯化钠使溶液中氯化钠的浓度为0.9g/ml，加入稳定剂吐温-80至溶液中的吐温-80质量浓度为1～2‰，除菌过滤后无菌分装即得转移因子注射剂。