[发明专利]一种混菌发酵物饲料添加剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种饲料添加剂，特别涉及一种混菌发酵物饲料添加剂及其制备方法，属于微生物发酵领域。

背景技术

混菌发酵是指两种或两种以上的微生物的协同作用共同完成某=发酵过程的新型发酵技术。混菌发酵具有能够获取某些纯种无法得到的产物，且混菌之间互利共栖协同作用，可能大于单独发酵混合后的累加效应，生长速度快，提高产率，发酵物利用率高等优点。

药用真菌具有2000多年的发展史，具有保健和治疗作用的自然资源。药用真菌多属于担子菌亚门和子囊菌亚门，种类繁多，形态各异，大多是由菌丝体和子实体两大部分组成。

真菌与真菌的混菌发酵物在畜禽健康养殖、促进畜禽免疫力提高等方面起到了重要作用。随着畜牧业的发展，抗生素类药物滥用现象明显，导致病菌耐药性增强，动物体内药物残留，严重影响了人类健康。药用真菌混菌发酵产物作为饲料添加剂，解决化学药物添加剂的使用产生的耐药性和药物残留问题。现有技术中，多采用单一菌种进行发酵制备饲料添加剂，产率低且效果不理想。中国专利CN101480226A公开了一种蝙蝠蛾拟青霉发酵物饲料添加剂及其制备方法，该饲料添加剂制备过程中采用摇瓶培养，无法直观的观察菌种的生长情况，菌种生长速度慢，且该发明中所使用的培养基易生成菌球，产率低。目前，尚未有关于朱红栓菌和北虫草混菌发酵的报道。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种利用朱红栓菌和北虫草混菌发酵而成的混菌发酵物饲料添加剂，该添加剂天然，安全绿色，营养价值高，且能预防疾病，提高畜禽免疫力且无药物残留。

本发明还提供了一种混菌发酵物饲料添加剂的制备方法，该方法能够菌种污染小，通过科学的配比各培养基，发酵产率高，制备的产物结构均匀。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

一种混菌发酵物饲料添加剂，所述混菌发酵物为朱红栓菌和北虫草混菌发酵而成。

上述混菌发酵物饲料添加剂的添加量为占动物饲料重量的0.1-0.2%。

本发明还提供了一种混菌发酵物饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

a.母种培育：将朱红栓菌和北虫草原种取1cm³分别接种到试管斜面培养基中，25℃活化7天后，母种备用；

所述斜面培养基为PDA培养基；

b.静置培养：分别取1cm³母种菌块，分别接种到装有1cm厚度PDA培养基的菌种瓶中，25℃下静置培养7天；

c.液态培养：培养结束后，向上述盛有朱红栓菌和北虫草的菌种瓶中，分别注入500ml液体培养基，25℃通气培养5天，得液态菌种；

d.将上述两种液态菌种各500ml同时接种到装有10L液体培养基的10L发酵罐中，25℃通气混合培养5天；

e.将上述混合培养的菌种转入装有100L液体培养基的100L发酵罐中，25℃通气混合培养5天；

f. 将上述混合培养的菌种转入装有1000kg液体培养基的1000kg发酵罐中，25℃通气混合培养10天；

上述操作过程均为在无菌条件下进行；

上述通气为通入经无菌过滤的洁净空气，通气量均为每升培养基0.1-0.3L。

本发明混菌发酵物饲料添加剂的制备方法中，所述PDA培养基的制备方法为：200g马铃薯煮烂过滤，向滤液中加入20g葡萄糖，3g KH₂PO₄，1.5g Mg₂SO₄·7H₂O，50-100mg 维生素 B₁，补水至 1000mL，加20 g 琼脂，加热融化后，121℃灭菌 30min即可。

本发明混菌发酵物饲料添加剂的制备方法中，所述菌种瓶的瓶口塞上有两个直径5mm圆孔，其中一圆孔用外径5mm不锈钢管通入瓶底，不锈钢管另一端链接通入空气的空气过滤器；另一圆孔链接用于排气的空气过滤器，并整体经121℃灭菌 30min。

本发明混菌发酵物饲料添加剂的制备方法中，所述液体培养基配方为：蛋白胨1%，葡萄糖2%,玉米淀粉1%，磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%，维生素B1 0.01%，消泡剂0.02%，余量为水；PH值为6.5。

上述液体培养基的制备方法为：称取配方质量的玉米淀粉加水溶解，然后加热至沸腾，搅拌糊化后加入蛋白胨、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1、消泡剂，搅拌均匀，121℃灭菌 30min即可。