[发明专利]一种混菌发酵物饲料添加剂及其制备方法

权利要求书

1.一种混菌发酵物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述混菌发酵物为朱红栓菌和北虫草混菌发酵而成；

具体包括以下步骤：

a.母种培育：将朱红栓菌和北虫草原种取1cm³分别接种到试管斜面培养基中，25℃活化7天后，母种备用；

所述斜面培养基为PDA培养基；

b.静置培养：分别取1cm³母种菌块，分别接种到装有1cm厚度PDA培养基的菌种瓶中，25℃下静置培养7天；

c.液态培养：培养结束后，向上述盛有朱红栓菌和北虫草的菌种瓶中，分别注入500ml液体培养基，25℃通气培养5天，得液态菌种；

d.将上述两种液态菌种各500ml同时接种到装有10L液体培养基的10L发酵罐中，25℃通气混合培养5天；

e.将上述混合培养的菌种全部转入装有100L液体培养基的100L发酵罐中，25℃通气混合培养5天；

f. 将100L发酵罐中混合培养的菌种全部转入装有1000kg液体培养基的1000kg发酵罐中，25℃通气混合培养10天；

上述操作过程均为在无菌条件下进行；

所述通气为通入经无菌过滤的洁净空气，通气量均为每升培养基0.1-0.3L。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述混菌发酵物饲料添加剂的添加量为占动物饲料重量的0.1-0.2%。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述PDA培养基的制备方法为：200g马铃薯煮烂过滤，向滤液中加入20g葡萄糖，3g KH₂PO₄，1.5g MgSO₄·7H₂O，50-100mg 维生素 B₁，补水至 1000mL，加20 g 琼脂，加热融化后，121℃灭菌 30min即可。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述菌种瓶的瓶口塞上有两个直径5mm圆孔，其中一圆孔用外径5mm不锈钢管通入瓶底，不锈钢管另一端链接通入空气的空气过滤器；另一圆孔链接用于排气的空气过滤器，并整体经121℃灭菌 30min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述液体培养基配方为：蛋白胨1%，葡萄糖2%,玉米淀粉1%，磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%，维生素B1 0.01%，消泡剂0.02%，余量为水；pH值为6.5。

6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述液体培养基的制备方法为：称取配方质量的玉米淀粉加水溶解，然后加热至沸腾，搅拌糊化后加入蛋白胨、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1、消泡剂，搅拌均匀，121℃灭菌 30min即可。

7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于：所述消泡剂是由蔗糖脂肪酸酯、羟甲基纤维素钠组成，所述蔗糖脂肪酸酯、羟甲基纤维素钠质量比为1:1。