[发明专利]检测大鼠毛发状梭菌的试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201510073363.2 | 申请日： | 2015-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN104611448A | 公开（公告）日： | 2015-05-13 |
| 发明（设计）人： | 刘月环;石巧娟;余强;王志远;钟宇森;吕宇 | 申请（专利权）人： | 浙江省医学科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 邱启旺 |
| 地址： | 310013 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 大鼠 毛发 状梭菌 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测大鼠毛发状梭菌的试剂盒，其特征在于，包括10×Taqman PCR缓冲液、50μmol·L-1的上游引物CPF的水溶液、50umol·L-1的下游引物CPR的水溶液、dNTP、25mmol·L-1的MgCl2水溶液、5U·L-1的Taq DNA聚合酶水溶液、标准阳性模板、20×SYRB Green荧光染料和无菌双蒸水；所述上游引物CPF的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物CPR的序列如SEQ ID NO.2所示；所述标准阳性模板为大鼠毛发状梭菌DNA。
2.一种检测大鼠毛发状梭菌的方法，其特征在于，该方法为使用权利要求1所述的试剂盒对大鼠毛发状梭菌进行荧光定量PCR检测。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR检测的反应体系为：2μL的10×Taqman PCR缓冲液；1μL浓度为50μmol·L-1的上游引物CPF的水溶液；1μL浓度为50umol·L-1的下游引物CPR的水溶液；0.8μL的dNTP；1.6μL溶度为25mmol·L-1的MgCl2水溶液；0.20 μL浓度为5U·L-1的Taq DNA聚合酶水溶液；1μL标准阳性模板或待测样品；0.4μL的20×SYRB Green荧光染料；无菌双蒸水加至总体积为20μL；所述PCR反应程序如下：95℃变性5min，94℃预变性30s，58℃退火30s，72℃度延伸45s，循环35次，最后72℃度延伸5min。
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