[发明专利]一种基于DNAH5基因的结肠癌诊断试剂盒有效
申请号: | 201510070003.7 | 申请日: | 2015-02-10 |
公开(公告)号: | CN104611446A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 侯春梅;韩根成;陈国江;王仁喜;肖鹤;黎燕;冯健男;沈倍奋 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 丛芳 |
地址: | 100850 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 dnah5 基因 结肠癌 诊断 试剂盒 | ||
1.DNAH5基因在制备基于DNAH5基因的结肠癌诊断试剂盒中的应用,其特征在于,所述诊断试剂盒包含DNAH5基因荧光实时定量PCR的引物对,所述引物分别为:
正向引物序列为5’-GACCACCGAGGCTCATAAGCAGTT-3’,如SEQ ID NO:1所示;
反向引物序列为5’-GCAGGTCTTGGCTGACACCACTATA-3’,如SEQ ID NO:2所示。
2.一种基于DNAH5基因的结肠癌诊断试剂盒,其特征在于,所述诊断试剂盒包含DNAH5基因荧光实时定量PCR的引物对,所述引物分别为:
正向引物序列为5’-GACCACCGAGGCTCATAAGCAGTT-3’,如SEQ ID NO:1所示;
反向引物序列为5’-GCAGGTCTTGGCTGACACCACTATA-3’,如SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求2所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述诊断试剂盒还包含管家基因GAPDH引物对,所述引物分别为:
正向引物序列为5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’,如SEQ ID NO:3所示;
反向引物序列为5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’如SEQ ID NO:4所示。
4.根据权利要求2所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述诊断试剂盒还包SYBR Green PCR的反应体系:PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
5.根据权利要求3所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述诊断试剂盒还包SYBR Green PCR的反应体系:PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
6.根据权利要求4所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述PCR缓冲液包含:20mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
7.根据权利要求5所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述PCR缓冲液包含:20mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
8.根据权利要求2-7中任一项所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系或RNA提取试剂;所述逆转录体系包含T重复寡核苷酸OligodT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs;所述RNA提取试剂包含Trizol、氯仿、异丙醇、75%乙醇。
9.根据权利要求8所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述逆转录反应液包含:250mM PH8.3的Tris-HCL、370mM的KCL、15mM的MgCL2、50mM的DTT。
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