[发明专利]耐盐微藻的选育方法在审
申请号: | 201510064739.3 | 申请日: | 2015-02-09 |
公开(公告)号: | CN104611231A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 孙予罕;吴通;赵权宇;魏伟;汪靓 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海高等研究院 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 高月红 |
地址: | 201210 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 耐盐微藻 选育 方法 | ||
1.一种耐盐微藻的选育方法,其特征在于,包括步骤:
1)将微藻藻株接种至初始培养基中,进行培养;
2)将培养后的微藻藻株接种至添加了氯化钠的进化培养基中进行培养;
3)以步骤2)为一个循环,将该藻株在添加了氯化钠的进化培养基中继续培养1~80个循环;
4)当该藻株在添加了氯化钠的进化培养基中生物量达到0.8-1.2g/L时,提高培养基中的氯化钠浓度,继续培养1~80个循环,使其生物量达到0.8-1.2g/L。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中,微藻藻株包括:念珠藻目藻类;
步骤1)中,接种的浓度为0.01~0.5g/L;
步骤1)中,培养的条件:培养温度为22-28℃,光照强度为50-200μmol/(m2·s),光照时间每天8-16h;培养的程度为培养至对数生长期。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述念珠藻目藻类包括:念珠藻或鱼腥藻。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述初始培养基的组分包括:磷酸氢二钾0.032-0.048g/L、七水合硫酸镁0.06-0.09g/L、二水合氯化钙0.029-0.043g/L、碳酸钠0.018-0.022g/L、柠檬酸0.005-0.007g/L、柠檬酸铁铵0.005-0.007g/L、EDTA 0.0009-0.0011g/L、微量元素溶液A51mL/L;
其中,所述微量元素液A5中的组分为:硼酸2.29-3.43g/L、二水合氯化锰1.45-2.17g/L、七水合硫酸锌0.178-0.266g/L、钼酸钠0.312-0.468g/L、五水合硫酸铜0.063-0.095g/L、六水合硝酸钴0.039-0.059g/L。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中,接种的浓度为0.01~0.5g/L;
步骤2)中,培养的条件:培养温度为22-28℃,光照强度为50-200μmol/(m2·s),光照时间为每天8-16h,培养的时间为2~10天。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中,添加了氯化钠的进化培养基中,氯化钠的浓度为0.59~5.85g/L;
步骤2)中,进化培养基的组分包括:磷酸氢二钾0.032-0.048g/L、七水合硫酸镁0.06-0.09g/L、二水合氯化钙0.029-0.043g/L、碳酸钠0.018-0.022g/L、柠檬酸0.005-0.007g/L、柠檬酸铁铵0.005-0.007g/L、EDTA 0.0009-0.0011g/L、微量元素溶液A51mL/L;
其中,所述微量元素液A5中的组分为:硼酸2.29-3.43g/L、二水合氯化锰1.45-2.17g/L、七水合硫酸锌0.178-0.266g/L、钼酸钠0.312-0.468g/L、五水合硫酸铜0.063-0.095g/L、六水合硝酸钴0.039-0.059g/L。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤4)的提高培养基中的氯化钠浓度中,将氯化钠浓度提高至3.52~11.70g/L。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法,还包括步骤:5)在上述步骤的基础上,以每次0.59~5.85g/L的幅度不断提高培养基中氯化钠的浓度,每次提高氯化钠浓度后培养1~80个循环,直至培养基中氯化钠最终浓度达到5.85-17.55g/L。
9.一种根据如权利要求1~8任一项所述的方法所获得的微藻。
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