[发明专利]一种pH敏感的双壳层载药缓释体系及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及用于蛋白等药物的控制释放技术领域，具体是涉及pH差异环境中蛋白等药物的保护及控制释放体系及其制备方法和用途。

背景技术

具有pH响应特点可控制释放蛋白等药物的体系在实际的口服用药、疫苗传递及肿瘤微环境用药等多个领域有着实际的应用意义。对pH敏感释药体系最基本的要求是药物在非目的pH中可保持相对稳定、且在目的pH中能迅速或持续的以需要浓度进行释放，进而到达目标细胞或组织。进一步的，为了提高药物控制释放的效率，通过体系对药物保持较为集中状态，或减小其在非目的组织中的流失，则可提高药物的相对浓度。目前基于微囊的药物载体相对单一，无法从多方面实现对蛋白药物的活性保护、特定环境中释放，虽然呈现了一定的效果，但仍有很大的改善空间。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)是一种常温下为固体脂的生物兼容性优良的生物分子，常被用作各类药物的包被及缓释运载体，各种研究表明PLGA能够对内容药物分子起到很好的保护和缓释作用。但是PLGA在酸性条件下不能稳定存在，由于颗粒较为分散，药物流失等问题同时存在。pH敏感生物材料可作为一类生物兼容效果好的药物运载体，与包裹的药物作用微小，可使被固定物质长期保持活性。由于能够对药物起到富集的作用，在水中稳定性好，在非目的pH条件下能有效避免药物流失；在目的pH条件下，运载体可发生构象变化，呈现亲水的特点，释放出内容物。生物高分子材料作为药物运载体对胃及其他组织的刺激小，生物安全性好。如何在合适条件下将酸性下不稳定的PLGA固定到酸性条件下为疏水的高分子内部，则是目前很少报道的关键技术。基于pH响应控释的蛋白等药物分子的活性保护及控制释放需要特点，本发明提供了一种pH响应的PMMMA-PLGA纳米联合运载体系。

发明内容

本发明的目的是提供一种以pH敏感壳层运载的PLGA缓释纳米载药体系及其制备和检测方法。

本发明通过如下技术方案实现：

一种pH响应的PMMMA-PLGA/药物双壳层载药体系，包括：内核、内壳层和外壳层，所述内核为药物，所述内壳层为乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)层，所述外壳层为在酸性条件下稳定的聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸)(PMMMA)层。

根据本发明，所述内壳层乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)是现有技术中已知的用于载药的缓释层。

根据本发明，所述的pH敏感的聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸)(PMMMA)层，在酸性条件下稳定，而在碱性条件下释放出内容物。该释放特性实现药物在碱性条件下的释放。优选地，所述聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸)(PMMMA)层是由三种前体甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸形成的共聚物。

在一个优选的实施方案中，所述药物为蛋白类药物，优选为具有生物活性的蛋白。更优选的，所述生物活性蛋白为报告蛋白，例如为重组绿色荧光蛋白Trx-EGFP。

在一个优选的实施方案中，所述蛋白等药物能够溶解于液相分散系。

在一个优选的实施方案中，所述pH敏感PMMMA控释体系是由如下制备方法获得：在含有PLGA载药颗粒的液相中，将甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸进行自由基聚合反应。优选的，由过硫酸铵(APS)引发该自由基聚合反应。还优选地，使用N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)为催化剂。

在一个优选的实施方案中，所述pH敏感PMMMA控释体系是由如下制备方法获得：在含有PLGA载药颗粒的液相中，依顺序先后加入甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸，再加入引发剂和催化剂。更优选地，在超声作用下，疏水性较强的甲基丙烯酸甲酯先通过疏水作用包裹PLGA，进而加入具有疏水性的丙烯酸甲酯包裹PLGA，最后在均匀分散的体系中加入亲水前体甲基丙烯酸，以及APS和TEMED，使反应得到的线性PMMMA高分子牢固包覆PLGA释药颗粒。

在一个优选的实施方案中，甲基丙烯酸甲酯：丙烯酸甲酯：甲基丙烯酸体积比为6-8:2-4:1-2，更优选地，体积比为6.5：2.5：1-2；还更优选地，体积比为6.5:2.5:1或6.5:2.5:2。

本发明还提供了一种制备所述双壳层载药体系的方法，包括如下步骤：

1)制备包裹有药物的PLGA载药颗粒；

2)制备包裹所述PLGA载药颗粒的pH敏感层PMMMA。