[发明专利]赭绿青霉及其在制备brefeldin A中的应用

权利要求书

1.一株赭绿青霉Penicillium ochrochloron SWUKD4.211，保藏号为CCTCC M 2015022。

2.如权利要求1所述的赭绿青霉，其特征在于：菌丝体较细，直径0.5～2.0μm，有横隔；分生孢子梗单生，有横隔，顶端无膨大的顶囊，帚状枝不分散，小梗不作披针形；分生孢子串生于小梗顶端，呈球形或亚球形，直径1.6～2.8μm。

3.如权利要求1或2所述的赭绿青霉，其特征在于：该菌的5.8s rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

4.采用权利要求1～3任一项所述的赭绿青霉发酵生产brefeldin A的方法，其特征在于：将赭绿青霉SWUKD4.211接种至适用于赭绿青霉的发酵培养基，130～210rpm、26～30℃发酵5～9天，发酵结束后，发酵液经分离纯化得到所述的次级代谢产物brefeldin A。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基组成如下：马铃薯200.0g/L，碳源20.0～40.0g/L，碳酸钙2.0～8.0g/L，硫酸铵0.0～2.0g/L，硫酸铜0.0～0.02g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，七水硫酸镁2.0g/L；pH5.0～7.0；其中，所述碳源为木糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖或可溶性淀粉中的至少一种。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述培养基成分为：马铃薯200g/L，麦芽糖20.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，七水硫酸镁2.0g/L，碳酸钙8.0g/L，硫酸铜0.01g/L；培养基的pH为7。

7.如权利要求4～6任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵转速为170rpm。

8.如权利要求4～7任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵温度为28℃。

9.如权利要求4～8任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵时间为9天。

10.如权利要求4～9任一项所述的方法，其特征在于所述的分离工艺如下：发酵液离心，收集上清液，乙酸乙酯充分萃取上清液后，收集萃取相，减压蒸馏回收乙酸乙酯，得到的粗提物用甲醇溶解，过滤，在低于60℃的加热板上结晶，重结晶，得到的无色棱状晶体，即为brefeldin A。

11.权利要求1～3任一项所述赭绿青霉在生产brefeldin A中的用途。