[发明专利]一种猪乙型脑炎重组腺病毒、穿梭载体、质粒及疫苗在审
| 申请号： | 201510053288.3 | 申请日： | 2015-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN104651403A | 公开（公告）日： | 2015-05-27 |
| 发明（设计）人： | 曹三杰;文心田;刘瀚扬;伍锐;黄小波;文翼平;岳辉喜;田耕;周玉鹏;袁磊 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N15/40;A61K48/00;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 四川君士达律师事务所 51216 | 代理人： | 芶忠义 |
| 地址： | 625000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 脑炎 重组 病毒 穿梭 载体 质粒 疫苗 | ||
1.一种猪乙型脑炎重组腺病毒穿梭载体，其特征在于，将乙脑病毒E基因、IRES基因和IL6基因顺次插入穿梭载体，得到含有目的基因的腺病毒穿梭载体。
2.如权利要求1所述的猪乙型脑炎重组腺病毒穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体为pAdtrack-CMV，所述腺病毒穿梭载体为pAdtrack-CMV-E-IRES-IL6。
3.一种猪乙型脑炎重组腺病毒质粒，其特征在于，将权利要求1或2所述的腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体在转化入大肠杆菌后发生同源重组，把外源基因E-IRES-IL6转入腺病毒骨架载体上，经筛选后得到含有外源基因E-IRES-IL6的重组腺病毒质粒。
4.如权利要求3所述的猪乙型脑炎重组腺病毒质粒，其特征在于，所述腺病毒骨架载体为pAdEasy-1。
5.如权利要求4所述的猪乙型脑炎重组腺病毒质粒，其特征在于，所述大肠杆菌为BJ5183。
6.一种猪乙型脑炎重组腺病毒，其特征在于，是权利要求3～5任一项所述的重组腺病毒质粒转染宿主细胞后得到的重组腺病毒rAd-E-IRES-IL6。
7.如权利要求6所述的猪乙型脑炎重组腺病毒，其特征在于，所述宿主细胞为HEK293细胞。
8.如权利要求7所述的猪乙型脑炎重组腺病毒，其特征在于，所述转染采用阳离子脂质体法转染。
9.一种猪乙型脑炎重组腺病毒疫苗，其特征在于，是将权利要求6～8中任一项所述的猪乙型脑炎重组腺病毒rAd-E-IRES-IL6接种宿主细胞中连续传代，且在宿主细胞内重组腺病毒E蛋白和IL6蛋白的转录和表达稳定后得到。
10.如权利要求9所述的猪乙型脑炎重组腺病毒疫苗，其特征在于，所述宿主细胞为HEK293。
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