[发明专利]与早产的发生相关的RANTES基因SNP分子标记及检测其的试剂盒在审
申请号: | 201510050767.X | 申请日: | 2015-01-30 |
公开(公告)号: | CN104630217A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
发明(设计)人: | 王艳;封志纯;张小爱;杨晓 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军北京军区总医院 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 早产 发生 相关 rantes 基因 snp 分子 标记 检测 试剂盒 | ||
1.一种与早产的发生相关的RANTES基因的SNP分子标记,其特征在于,其SNP位点为IN1.1T/C。
2.权利要求1所述SNP分子标记在制备判断早产发生风险的试剂盒中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,当个体RANTES基因IN1.1T/C位点为CC基因型时,表明其对早产的易感性高。
4.权利要求1所述SNP分子标记在制备判断早产发生风险的诊断试剂中的应用。
5.用于检测权利要求1所述SNP分子标记的引物对,其特征在于,其核苷酸序列为:
上游引物:5’-CCTGGTCTTGACCACCACA-3’,
下游引物:5’-GCTGACAGGCATGAGTCAGA-3’。
6.含有权利要求5所述引物对的试剂盒。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,利用PCR对IN1.1T/C位点的核苷酸进行检测。
8.如权利要求6或7所述的试剂盒,其特征在于,其工作程序为:
(1)提取待测样品基因组DNA,以其为模板,以权利要求5所述的引物对为扩增引物,进行PCR反应;所述PCR反应在95℃5min预变性后进行2个阶段的扩增:第1阶段为94℃变性30s,退火温度从58℃开始每个循环降0.5℃退火30s,72℃延伸50s,一共16个循环;第2阶段为94℃变性30s,50℃退火30s,72℃延伸50s,一共14个循环;最后72℃延伸7min;
(2)回收扩增产物,测序,根据峰图判断基因型。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,步骤(1)中PCR扩增的反应体系为:总体系为25μl时,含有基因组DNA:20ng,1×Ex Taq Buffer,dNTP 0.2mM,上下游引物各0.2mM,Ex Taq Polymerase DNA聚合酶0.5U,加水补至25μl反应体系。
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