[发明专利]一种引物对及其用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法在审
申请号: | 201510023321.8 | 申请日: | 2015-01-16 |
公开(公告)号: | CN104531888A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 章尧;张普宏;高家林;孟宇;王李卓;吕俊 | 申请(专利权)人: | 皖南医学院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人: | 范奇 |
地址: | 241000 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 引物 及其 用于 检测 apom 基因 启动 子区 724 方法 | ||
1.一种引物对,所述引物对是根据一个2型糖尿病相关基因的序列设计的,其特征在于:所述的2型糖尿病相关基因为ApoM基因,所述的引物对用于检测ApoM基因启动子区-724位点。
2.根据权利要求1所述的引物对,其特征在于:所述引物对是SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1或2任一项所述一种引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a.提取样品的全基因组DNA;
b.根据所述引物对对提取的基因组DNA进行PCR扩增,然后对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,以2000bp mark为标尺,根据扩增片段大小,确定检测目的片段并回收纯化;
c.对纯化后的检测目的片段进行测序。
4.根据权利要求3所述引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于:所述步骤b中回收纯化包括制胶、上样、电泳、割胶、溶胶、柱平衡、转移、漂洗、洗脱回收、浓度与纯度检验的步骤。
5.根据权利要求4所述引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于:所述柱平衡的步骤之前有一个柱预处理的步骤。
6.根据权利要求4所述引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于:所述洗脱回收的步骤中洗脱体积不小于30μ1。
7.根据权利要求4所述引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于:所述洗脱回收的步骤中洗脱液为ddH2O,pH值控制在7.0-8.5之间。
8.根据权利要求4所述引物对用于检测Apom基因启动子区-724位点的方法,其特征在于:所述洗脱回收的步骤得到的产物保存在-20℃。
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