[发明专利]同时检测烯草酮CLE和氯酯磺草胺EDP残留的试纸条及其制备方法在审
申请号: | 201510022918.0 | 申请日: | 2015-01-16 |
公开(公告)号: | CN104714016A | 公开(公告)日: | 2015-06-17 |
发明(设计)人: | 王弋博;牛小东;谢晓玲 | 申请(专利权)人: | 天水师范学院 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人: | 张克勤 |
地址: | 741001 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同时 检测 烯草酮 cle 氯酯磺草胺 edp 残留 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种同时检测烯草酮CLE 和氯酯磺草胺EDP残留的试纸条,试纸条为胶体金免疫层析试纸条,它包括背板(2)、吸水垫(3)、硝酸纤维膜(4)、结合垫(7)、样品垫(8),所述背板(2)上依次连续粘附有吸水垫(3)、硝酸纤维膜(4)、结合垫(7)和样品垫(8),所述样品垫(8)靠结合垫(7)一端搭接在结合垫(7)上,所述吸水垫(3)上表面吸附有手控区封膜(1),所述样品垫(8)上表面吸附有样品端封膜(9),其特征在于:所述硝酸纤维膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG质控线(5)和DCL-BSA两条检测线(6),结合垫(7)上包被有抗CLE 和EDP 药物单克隆抗体-胶体金标记物。
2.根据权利要求1所述的同时检测烯草酮CLE 和氯酯磺草胺EDP残留的试纸条的制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:
步骤一、将半抗原去环酯烯草酮DCL与牛血清白蛋白偶联合成偶联物DCL-BSA;
步骤二、将步骤一合成的所述偶联物DCL-BSA免疫原免疫小鼠,通过细胞融合筛选得到抗CLE 和EDP 药物单克隆细胞株,分别将得到的抗CLE 和EDP药物单克隆细胞株注射到小鼠腹腔,得到抗CLE 和EDP 药物单克隆抗体,该抗体与烯草酮CLE 和氯酯磺草胺EDP有较高的交叉反应;
步骤三、用柠檬酸三钠与氯金酸反应制备胶体金;
步骤四、提取小鼠IgG免疫健康家兔,得到兔抗鼠IgG抗体;
步骤五、将步骤二制成的所述抗CLE 和EDP 药物单克隆抗体加入步骤三制备的胶体金中,得到抗CLE 和EDP 单克隆抗体-胶体金标记物;
步骤六、将步骤五制备的所述抗CLE 和EDP 单克隆抗体-胶体金标记物包被在所述结合垫(7)上;
步骤七、将步骤一合成的所述偶联物DCL-BSA分别包被在所述硝酸纤维素膜(4)中,得到检测线(6);
步骤八、将步骤四中制备的所述兔抗鼠IgG抗体包被在所述硝酸纤维素膜(4)中,得到质控线(5);
步骤九、将所述手控区封膜(1)、所述吸水垫(3)、所述硝酸纤维素膜(4)、所述结合垫(7)、所述样品垫(8)和所述样品端封膜(9)依次粘贴在所述背板(2)上,制得同时检测烯草酮CLE 和氯酯磺草胺EDP残留的试纸条。
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