[发明专利]植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定的引物及方法有效
| 申请号: | 201510017831.4 | 申请日: | 2015-01-14 |
| 公开(公告)号: | CN104450951A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
| 发明(设计)人: | 伍文宪;刘勇;张蕾;黄小琴;尹全;刘红雨;宋君;王东;周西全 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院植物保护研究所;刘勇 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 杨军 |
| 地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 植物 病害 镰刀 快速 鉴定 引物 方法 | ||
1.植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定的引物,其特征在于,
上游引物序列:5'-CAGGGTAGGCAGCTTAGATTTGG-3';
下游引物序列:5'-GACGGATTTGGCGAACCTACCCT-3'。
2.植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)合成以下引物,
上游引物序列:5'-CAGGGTAGGCAGCTTAGATTTGG-3';
下游引物序列:5'-GACGGATTTGGCGAACCTACCCT-3';
(2)制备土传病害真菌的DNA稀释液;
(3)配制PCR反应体系;
(4)常规PCR检测。
3.根据权利要求2所述的植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定方法,其特征在于,步骤(1)中合成的引物的浓度均为10μmol/l,步骤(2)中制备的DNA稀释液的浓度为50ng/μl。
4.根据权利要求3所述的植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定方法,其特征在于,步骤(3)中所述的配制PCR反应体系,包括以下组分:
Taq Mix 10μl
上游引物 2μl
下游引物 2μl
DNA稀释液 1μl
ddH2O 5μl。
5.根据权利要求2或4所述的植物土传病害尖孢镰刀菌快速鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应条件为:94℃预变性3min,94℃变性30s,65℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环;72℃终止10min。
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