[发明专利]一种荚膜多糖的纯化方法在审
申请号: | 201510012526.6 | 申请日: | 2015-01-11 |
公开(公告)号: | CN104592408A | 公开(公告)日: | 2015-05-06 |
发明(设计)人: | 黄镇;王铭 | 申请(专利权)人: | 云南沃森生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 昆明合众智信知识产权事务所 53113 | 代理人: | 康珉 |
地址: | 650106 云南省昆明市*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荚膜 多糖 纯化 方法 | ||
1.一种荚膜多糖的纯化方法,其特征在于:
(1)将荚膜多糖粗制品用注射用水溶解至荚膜多糖粗制品的终浓度为2~20mg/ml,再加入CaCl2和乙醇,使CaCl2的终浓度为0.3~0.8mol/L,乙醇的终浓度为20~35%(ml/ml),充分搅拌后,静置沉淀6~12小时后离心,收集上清;
(2)上清液用孔径为10~100KD膜超滤,得超滤浓缩液1,超滤所用的注射用水体积为上清液体积的10~20倍;
(3)向超滤浓缩液1中加入十六烷基三甲基溴化铵至十六烷基三甲基溴化铵的终浓度为0.5~5%(g/ml),充分搅拌后,静置沉淀6~12小时后离心,收集沉淀;
(4)沉淀用浓度为0.05~0.5mol/L盐溶液溶解,离心收集上清,并进行澄清过滤得滤液;
(5)滤液用孔径为10~100KD膜超滤浓缩,得超滤浓缩液2,超滤浓缩所用的注射用水体积为上清液体积的5~10倍;
(6)超滤浓缩液2经冷冻干燥,即为纯化的荚膜多糖。
2.根据权利要求1所述的一种荚膜多糖的纯化方法,其特征在于:所述的荚膜多糖为细菌荚膜多糖包括但不限于以下任意一种:肺炎球菌荚膜多糖、脑膜炎双球菌荚膜多糖、b型流感嗜血杆菌荚膜多糖、伤寒Vi荚膜多糖。
3.根据权利要求1或2所述的一种荚膜多糖的纯化方法,其特征在于:步骤(2)所用的膜包括但不限于以下任意一种:超滤膜、中空纤维滤膜。
4.根据权利要求1或2所述的一种荚膜多糖的纯化方法,其特征在于:步骤(5)所用的膜包括但不限于以下任意一种:超滤膜、空纤维滤膜。
5.根据权利要求1或2所述的一种荚膜多糖的纯化方法,其特征在于:步骤(4)所述的盐包括但不限于以下任意一种:NaCl、CaCl2、MgCl2。
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